1型糖尿病对小鼠胰岛IAPP、SS、CD68、CD22阳性细胞表达和对血清IL12、IL4水平影响的研究.pdfVIP

贵阳医学院 2014 届硕士研究生论文 1 型糖尿病对小鼠胰岛 IAPP、SS、CD68、CD22 阳性细胞表达 及对血清 IL-12、IL-4 水平影响的研究 组织学与胚胎学 研究生：李容瑢 导师：梁文妹教授 【摘要】 目的 研究 1 型糖尿病(T1DM)对小鼠胰岛胰淀粉样多肽（IAPP）阳性细胞、 生长抑素（SS）阳性细胞、CD68、CD22 阳性细胞表达及血清白介素-12（IL-12）、白介 素-4（IL-4）水平的影响，探讨 T1DM 导致胰岛内分泌细胞，浸润胰岛的免疫细胞及血 清相关细胞因子改变的可能机制。方法 正常雄性 C57BL/6J 小鼠 104 只，随机分为正常 对照组，盐水对照组及糖尿病实验组。小剂量多次注射链脲佐菌素（MLD-STZ）建立 T1DM 小鼠模型，分别于第 3、7、10、14、21、28d 测空腹血糖，取胰尾组织及血清，采用免 疫组化 SABC 法、激光扫描共聚焦显微镜免疫荧光双标检测法、酶联免疫吸附法(ELISA)、 图像分析及形态计量法进行研究。结果 1.与正常组及盐水对照组比较，实验组小鼠空腹 血糖水平自 14d 开始升高，28d 升至最高（P0.01）。2.实验组小鼠胰岛数目减少，胰岛 面积有所减小。3.实验组 IAPP 阳性细胞的免疫染色强度逐渐增强，平均光密度自 7d 开 始增高，与正常及盐水对照组比较差异具有显著性（P0.05）；而 IAPP 阳性细胞面数密 度（NA）自 3d 开始减少（P0.05）。4. 实验组小鼠胰岛 SS 阳性细胞免疫染色强度有所 增强，平均光密度值自 7d 时间点开始增高（P0.05）； SS 阳性细胞 NA 自 3d 开始增加 （P0.05）。5.免疫荧光双标法显示小鼠胰岛 IAPP 和 SS 在部分细胞有共表达。6.与正常 及盐水对照组比较，实验组各时间点小鼠胰岛 CD68 阳性细胞的 NA 明显高于正常组和盐 水对照组(P0.01)，但其中 10d 的 NA 在实验组相对较低。7.实验组各时间点胰岛 CD22 阳性细胞的 NA 值均高于正常组和盐水对照组(P0.01)，以 7d 最高。8. 血清 ELISA 结果 显示，实验组小鼠血清 IL-12 水平自 7d 开始增高（P0.05）；而实验组血清 IL-4 水平与 正常及盐水组相比有所降低，差异有统计学意义（P0.05）。 结论 1. T1DM 小鼠胰岛数 目减少，胰岛面积有所减小。2. T1DM 小鼠胰岛 IAPP 阳性细胞数目减少，但表达增强； SS 阳性细胞数量及表达均上调；IAPP 和 SS 在部分细胞有共表达。提示 IAPP 阳性细胞 和 SS 阳性细胞均参与了 T1DM 的病变过程。3. CD68 及 CD22 阳性细胞在病程早期即浸 润胰岛，有可能通过抗原递呈等作用促进了 T1DM 的发生。4.实验组小鼠血清 IL-12 增 高，IL-4 减少，提示 Th1/Th2 细胞失衡，推测是引发 T1DM 的重要因素。 【关键词】胰淀粉样多肽；生长抑素；巨噬细胞；B 淋巴细胞；白介素-12；白介素-4； 链脲佐菌素；1 型糖尿病；免疫组织化学；酶联免疫吸附法；免疫荧光