免疫细胞的凋亡绪论.ppt

第十三章 免疫细胞的凋亡;第一节?凋亡的生物学特征;一、凋亡的概念;凋亡的形态特征是，细胞首先皱缩，随即与邻近细胞脱离，失去微绒毛，胞浆浓缩，内织网扩张呈泡状并与细胞膜融合，核染色质密度增高呈半月形，并凝集在核膜周边，核仁裂解，进而胞膜内陷将细胞自行分割为多个外有膜包裹、内涵物不外溢的细胞小体—凋亡小体。;;二、凋亡与坏死、程序化死亡;;第二节 细胞凋亡的诱导剂和抑制剂;（一）Ca2+、Mg2+;（二）糖皮质激素;（三）细胞因子（CK）;（四）细胞表面受体和配体的相互作用;（五）抗体;（六）细胞内信号分子调节剂;（七）超抗原、丝裂原;第三节 细胞凋亡的生化改变;一、胞内Ca2+ 浓度增高;二、内源性核酸内切酶激活 ;三、生物大分子的合成 ;第四节?凋亡的启动;;第五节 死亡受体介导的细胞凋亡;一、肿瘤坏死因子受体超家族;（一） TNFR超家族的结构特征;TNFR超家族成员的胞浆区变化比较大，最短的只有21aa，最长的如TNFRI，有233aa。各成员间胞浆区没有明显的同源性，但介导细胞凋亡信号的成员，如TNFRI和Fas的胞浆区均含有约一个60 ? 80aa的同源序列，称为死亡结构域(death domain，DD)，该结构域与这些受体的凋亡信号及其它信号的转导有关。;（二） TNFR超家族的成员;;1．Fas/FasL （1） Fas与FasL的结构与分布 Fas（CD95）也称Apo-1，Fas基因定位于人染色体10q24.1。其编码产物分子量为45kDa的 I 型跨膜蛋白，由胞外区（157aa）、跨膜区（17aa）及胞浆区（145aa）组成。;对Fas胞浆区氨基酸序列的比较发现，它与TNFRI有一段68aa的同源序列，这段序列对Fas和TNFRI所介导的细胞凋亡起着决定性的作用，用基因突变的方法将同源区进行改造后，它们就丧失了致凋亡的能力，所以这一同源区被命名为死亡结构域（death domain，DD）。 以后的研究发现，死亡结构域也存在于其它死亡受体以及一些胞浆内信号转导蛋白，受体的死亡结构域可以与胞浆信号蛋白的死亡结构域发生同源或异源结合，所以这个结构域的作用是作为一个接头将死亡受体与胞浆信号通路联系起来。;Fas主要以膜受体形式存在，还可通过在转录水平的不同拼接产生可溶性Fas分子（sFas），后者在细胞凋亡中起调节作用。 Fas较广泛地分布于多种类型的细胞，包括外周活化T、B淋巴细胞、NK细胞、单核细胞、成纤维细胞、内皮细胞、上皮细胞、肝胆管细胞、卵巢细胞、子宫内膜细胞及皮肤组织细胞等。 某些组织细胞经活化后也可诱导Fas表达。;;;（3）Fas和FasL诱导细胞凋亡的机制 Fas一旦和配体FasL结合，可通过Fas分子启动致死性信号转导，最终引起细胞一系列特征性变化，使细胞死亡。 Fas作为一种普遍表达的受体分子，可以出现在多种细胞表面，包括淋巴细胞。但FasL的表达却有其特点，通常只出现于活化的T细胞(特别是活化的CTL)和NK细胞，因而已被活化的杀伤性免疫细胞，往往能够最有效地以凋亡途径置靶细胞于死地。 表达FasL的效应杀伤细胞会与自身表达的Fas结合，诱导自身的凋亡过程（AICD）。;Fas分子胞内段带有特殊的死亡结构域(DD,death domain)。三聚化的Fas和FasL结合后，使三个Fas分子的死亡结构域相聚成簇，吸引了胞浆中另一种带有相同死亡结构域的蛋白FADD。 FADD由两部分组成：DD和DED。DED指死亡效应结构域，因而FADD是死亡信号转导中的一个连接蛋白。该蛋白再以其DED连接另一个带有DED的后续成分，即caspase 8，后者作为酶原而被激活，引发一组caspase的级联反应。;;（4）Fas/FasL异常所引起的疾病 小鼠天然突变性疾病(lymphoproliferation， lpr) 的突变发生于小鼠19号常染色体。 对lpr小鼠Fas基因的分析发现，一个长约5.7kb的反转座子ETn插入到Fas基因的第二个内含子。这个ETn在长末端重复序列(LTR)中带有一个多聚腺苷酸信号(AATAAA)，引起Fas基因的异常剪接和提前终止。在lpr小鼠肝脏和胸腺只有非常少的Fas mRNA，而且往往成熟mRNA中只有外显子1和2，不能编码正常Fas。 lpr小鼠明显的特征是出现大量自身反应性CD4+T细胞，能辅助B细胞产生抗体，而不出现AICD。;2．TNFRI （1）TNFRI的结构 肿瘤坏死因子受体I(TNFRI)，CD编号为CD120a，是55?60kD I型跨膜糖蛋白，成熟膜蛋白长426aa。胞膜外区(182aa)有4个CRD，其中有3个N-糖基化位点。跨膜区有21aa，胞浆区较长，有223aa，有3个蛋白激酶C(PKC)作用位