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HPLC-TOF-MS分析盐酸羟苄唑原料有关物质 张肖宁，刘云飞，杨丽红* （黑龙江省食品药品检验检测所，哈尔滨150078） 摘要 目的：对盐酸羟苄唑原料中的有关物质进行分析，分析其杂质来源。方法: 采用HPLC-TOF-MS法。色谱柱 为Zorbax XDB C18(4.6 mm×150mm，5 μm)，流动相为甲醇-乙腈-醋酸铵缓冲液（pH4.0）（20:10:70），流量1.0ml·min-1，检测波长277nm；采用电喷雾离子源（ ESI），，离子源温度为120℃，， 正/负离子扫描检测，一级全扫描及二级扫描测定，质量扫描范围m/z100~1200。结果：初步分析有两个主要杂质,并推测其结构及来源。结论：本方法的分析结果，可为盐酸羟苄唑原料质量标准提高提供重要依据，并为其质量控制提供保障。 关键词： 盐酸羟苄唑；高效液相色谱；质谱；有关物质 HPLC-TOF-MS Analysis on Hydrobenzole Hydrochloride Related Substances Zhang Xiaoning, Liu Yunfei, Yang Lihong* (Heilongjiang Institute for Food and Drug Control, Harbin 150078) Abstract Objective: To analyze the related substances of Hydrobenzole Hydrochloride and the source of impurity. Methods: An HPLC-TOF-MS method was adopted. The assay was performed on a Zorbax XDB C18 column (4.6 mm × 150mm, 5 μm)with a mobile phase of methanol - acetonitrile - ammonium acetate buffer (pH 4.0) (20:10:70)at a flow rate of 1.0ml · min-1， the detection wavelength was 277nm. The full scan and two stage scanningwas employed for detection with ESI source in positive/negative ion mode. the source temperaturewas 120 ℃ ，， and mass scan range was m/z 100~1200. Results: Two main impurities were analyzed preliminarily, the structures and origins were speculated.Conclusion: The results of analysis can provide an important basis for improving the quality standards and protection for their quality control. Key words：Hydrobenzole Hydrochloride; HPLC; MS；related substance 羟苄唑（hydrobenzole）【1H-苯并咪唑-2-苯基甲醇；2-羟基苄基咪唑；2-（羟基苯基）苯并咪唑；（2-苯并咪唑）苯基甲醇;】为第二代头孢菌素，除具头孢唑啉相同作用外，还对一些革兰阳性菌有抗菌作用。[1]盐酸羟苄唑为羟苄唑的盐酸盐能选择性抑制被感染细胞的微小RNA病毒聚合酶，在组织培养中，本品50μg/ml能有效地抑制人类肠道病毒，柯萨奇病毒和脊髓灰质炎病毒等多种株型；本品10μg/ml能抑制急性???行性出血性结、角膜炎。本品抗微小RNA病毒作用机制，一般认为是在感染细胞内抑制病毒配码的依赖RNA的RNA聚合酶，使病毒RNA合成受阻，从而发挥抑制病毒作用。[1] 图1 盐酸羟苄唑分子结构式（260.076 CAS:50-97-5） 常规合成路线由苯并咪唑、扁桃酸、盐酸苯二胺等为原料进行合成，有专利表明可以以苯甲醛为起始原料，经与三氯甲烷在氢氧化钠催化作用下合成α-苯羟乙酸，后者再与邻苯二胺缩合、精制、成盐得到盐酸羟苄唑[2]。本研究所收集企业的样品生产工艺为邻苯二胺（m/z=108.069）与扁桃酸（m/z=152.047）经缩合反应生成盐酸羟苄唑,合成路线见图2。 图2 盐酸羟苄唑合成路线 盐酸羟苄唑现行标准[3]采用TLC法控制其有关物质，该方法无系