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第十单元;1.涵盖范围; ⑤动物细胞培养和单克隆抗体的制备及应用。
⑥核移植技术。
⑦胚胎工程中胚胎移植和胚胎分割。
⑧干细胞的研究。 ;3.复习指导;第 37 课时;突破考点·提炼方法; 1.基因工程的概念理解 ⑴操作环境:体外——关键步骤“基因表达载体的构建”的环境。 ⑵优点 ①与杂交育种相比:克服了远缘杂交不亲和的障碍。 ②与诱变育种相比:定向改造生物遗传性状。 ⑶操作水平:分子水平。 ⑷原理:基因重组。 ⑸本质:甲(供体:提供目的基因)乙(受体:表达目的基因),即基因未变,合成蛋白质未变,只是合成场所的转移。 ; 2.基因工程的基本原理和理论基础概括如下图 ; 3.操作工具 ⑴限制性核酸内切酶——“分子手术刀” ①来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。 ②化学本质:蛋白质。 催化作用:所以可重复利用 可用于目的基因的切割和在台的切割 ④作用特点:特异性,即限制酶可识别特定的脱氧核苷酸序列,切割特定位点。 错位切:产生两个相同的粘性末端 平切:形成平末端; 提醒 ①切割的化学键为磷酸二酯键。 ②在切割目的基因和载体时要求用同一种限制酶,目的是产生相同的黏性末端。 ③将一个基因从DNA分子上切割下来,需要切两处,同时产生4个黏性末端。 ④不同DNA分子用同一种限制酶切割产生的黏性末端都相同,同一个DNA分子用不同的限制酶切割,产生的黏性末端一般不相同。 ; (2)DNA连接酶——“分子缝合针” ; (3)基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” ; 提醒 ①一般来说,天然载体往往不能满足人类的所有要求,因此人们根据不同的目的和需要,对某些天然的载体进行人工改造。 ②常见的标记基因有抗生素抗性基因、产生特定颜色的表达产物基因、发光基因等。 ③作为载体必须具有一个至多个限制酶切点,而且每种酶的切点最好只有一个。因为某种限制酶只能识别单一切点,若载体上有一个以上的酶切点,则切割重组后可能丢失某些片段,若丢失的片段含复制起点区,则进入受体细胞后便不能自主复制。一个载体若只有某种限制酶的一个切点,则酶切后既能把环打开接纳外源DNA片段,又不会丢失自己的片段。 ④注意与细胞膜上载体的区别,两者的化学本质和作用都不相同。 ⑤质粒能自我复制,既可在自身细胞、受体细胞内,也可在体外。 ; 1.(2010·浙江卷,2)在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中,如下操作错误的是( ) A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C.将重组DNA分子导入烟草原生质体 D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞 ; 解析 限制性核酸内切酶用于提取目的基因和切割载体,烟草花叶病毒的遗传物质是RNA,不能用限制性核酸内切酶切割,A项错误;DNA连接酶可以连接具有相同黏性末端的目的基因和载体,B项正确;受体细胞可以是受精卵或体细胞,也可以是去除细胞壁的原生质体,C项正确;目的基因为抗除草剂基因,所以未成功导入目的基因的细胞不具有抗除草剂的能力,筛选时应该用含除草剂的培养基筛选转基因细胞,D项正确。 ;考点113 以流程图解决知识内在联系
——基因工程的操作步骤 ; ⑵基因工程技术生产凝乳酶的过程 ; 2.基因工程的操作程序分析 ⑴目的基因的获取途径: ①从自然界已有的物种中分离出来,如从基因组文库或cDNA文库中获取。; ③PCR扩增技术与DNA复制的比较 ; ⑵基因表达载体的构建——最核心步骤 ①基因表达载体的组成:启动子、目的基因、终止子以及标记基因等。 ; ②基因表达载体的构建方法 ; ⑶将目的基因导入受体细胞 ; ⑷目的基因的检测和鉴定 ; 2.如图为获得抗虫棉的技术流程。在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。 ; 请据图回答: ⑴A过程所用的载体是______,需要的工具酶有______和______。 ⑵C过程的培养基除含有必需的营养物质、琼脂和激素外,还需加入______。 ⑶由图中离体棉花叶片组织获得转基因抗虫植株可采用______技术,该技术所依据的原理是___ 。 ⑷如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测,D过程应该用放射性同位
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