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2015版高考生物大二轮专题突破练习 专题九
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[考纲要求] 1.酶在洗涤等方面的应用(A)。2.制备和应用固相化酶(A)。3.发酵食品加工的基本方法(A)。4.微生物的分离和培养(A)。5.实验:(1)探究酶在洗涤方面的应用(b);(2)酵母细胞的固定化技术(b);(3)腐乳的制作(a);(4)果酒和果醋的制作(b);(5)微生物的分离与培养(b);(6)DNA的粗提取与鉴定(b)。
[构建网络]考点一 微生物的利用
1.有关微生物实验的基本方法
(1)制备培养基:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
(2)无菌技术:主要指消毒和灭菌。
(3)倒平板操作:待培养基冷却至50 ℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板。
(4)平板划线法:是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
(5)稀释涂布平板法:先将菌液进行一系列的梯度稀释后涂布平板,在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而在培养基表面形成单个菌落。如图:
2.微生物的分离与培养
(1)分离方法:选择培养基。
(2)某种微生物的分离
①土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
a.筛选菌株:利用选择培养基筛选菌株。
b.计数方法:稀释涂布平板法和显微镜直接计数法。
c.过程:土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察。
②分解纤维素的微生物的分离
a.实验原理
即:可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
b.流程:土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌落。
(3)鉴定方法
鉴定分解尿素的细菌含酚红指示剂的尿素为唯一氮源的培养基→细菌→指示剂变红,则该菌能分解尿素鉴定纤维素分解菌[错混诊断]
1.在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间,这样做的目的是检测培养基上的细菌含量(2014·新课标Ⅱ,39(1)改编)( × )
2.某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养(2013·江苏,18C)( × )
3.纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法(2011·新课标,39(2)改编)( √ )
4.在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌(2011·重庆,2A)( × )
5.检测土壤中细菌总数实验操作中,确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数(2009·安徽,6D)( × )
6.培养微生物的培养基分装到培养皿后进行灭菌(2013·江苏,18A改编)( × )
题组一 从微生物的实验室培养进行命题
1.(2014·新课标Ⅱ,39)为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题:
(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是__________________________________;然后,将1 mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为______________。
(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过________灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是____________________________________________。
(3)示意图A和B中,________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液中__________的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高____________的利用率。
答案 (1)检测培养基平板灭菌是否合格 3.8×107 (2)灼烧 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 (3)B (4)溶解氧 营养物质
解析 (1)为了检测培养基平板灭菌是否合格,可在涂布接种前,随机取灭菌后的空白平板先行培养一段时间。0.1 mL稀释液中平均有(39+38+37)/3=38个活菌,则每毫升稀释液中活菌的数目为38/0.1=380,则稀释前每毫升水样中活菌数目为380×100=3.8×104,则每升水样中活菌数目为3.8×104×1 000=3.8×107。(2)接种环、接种针等金属用具可直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,以达到迅速彻底灭菌的目的。在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,其目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。(
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