色谱分析-绪论.pptVIP

色谱分析法chromatography ;色谱分析法概论;色谱分析法定义;利用物质的物理及物理化学性质的差异，将多组分混合物进行分离和测定的一种分析方法。 色谱分析法是仪器分析常用的方法之一。 应用对象：主要是混合物中有机成分的分离和分析。;色谱分析法的发展历史;石油醚(流动相);;1941年，A.J.P.Martin R.L.M.Synge 分配色谱法 （色谱发展的一个重要转折点,获1952年诺贝尔奖） 氨基酸水溶液，硅胶色谱柱，氯仿洗脱 提出色谱塔板理论 1952年，气相色谱法，塔板理论(1952，Nobel prize) 1956，Van Deemter速率方程 ; ;;1956，Golay， 毛细管柱，理论塔板数和分离效能 1957，Holmes 气相和质谱联用 1959，Porath and Flodin 多孔凝胶 空间排阻色谱法(分子量和分子大小) 1970 高效液相色谱(HPLC) 检测模式和性能优越的检测器 1975，H. small 离子色谱，阴离子色谱分析 ;薄层色谱法发展;;;;;1979，石英毛细管色谱柱 毛细管电泳技术 1981，熔融石英毛细管 电迁移进样 荧光检测 蛋白质分析、糖分析、DNA测序、手性分离、单细胞分析;;;;;;;;;;;;;;;;;色谱分析法的分类;吸附色谱：adsorption chroma-吸附性能的差异 气固 液固 分配色谱：partition chroma-分配系数的不同 溶解度 液体 离子交换色谱：ion exchange chroma-分离组分与固定相离子进行可逆交换 离子交换树脂 空间排阻色谱molecular exclusion chroma-：分子筛 葡聚糖凝胶 亲和色谱 affinity chroma- 利用生物大分子：酶与底物，酶与辅酶，抗原与抗体;柱色谱（CC） column chroma-(玻璃、不锈钢、石英) 气固 液固 纸色谱(PC) paper chroma-纸 液液 薄层色谱(TLC) thin layer chroma- (硅胶、聚酰胺) 液固;5、按色谱技术分类;;;;色谱分析法的特点和局限性;;气相色谱 气体黏度小 长色谱柱 高效液相色谱 高压泵 多色谱填料;3、灵敏度高、样品用量少;气相色谱 气体 易挥发的有机物 沸点高 热裂解 高效液相色谱 不易挥发、高沸点 不稳定 糖类、大分子化合物 药物分析 石油工业、环境保护、临床化学、药物与药剂、农药、食品、卫生防疫理化检验、司法检验;无法给出定性结果，需要已知的标物质作对比，或将样品的数据与标准物质??数据进行对比，与质谱、红外等波谱鉴定仪器联用 定量时需要标准物质 对个别异构体和固体物质分析能力差;色谱图和相关术语;2、基线(baseline)：当没有组分进入检测器时，色谱流出曲线是一条只反映仪器噪声随时间变化的曲线。 (正常操作条件下，检测器对流动相的响应信号);3、色谱峰(chromatographic peak) 样品随流动相经过色谱柱后，分离开的各组分经过检测器时产生的吸收峰，峰状为微分曲线。;;;6、峰高 色谱峰最高点至峰底的垂直距离 AB 表示符号:h;;;;死体积V0：色谱柱管内固定相颗粒间空隙、色谱仪管路和连接头间空隙和检测器间隙的总和。忽略后两项可得到：;保留体积Vr：指从进样到待测物在柱后出现浓度极大点时所通过的流动相的体积。;色谱曲线的意义;色谱现代发展及相关联用技术;２、技术发展 1) 超临界流体色谱 supercritical fluid chromatography, SFC 超临界流体 特点：同时具有气相色谱和液相色谱的优点。 变更压力、温度等参数可以改变超临界流体的密度，即改变它的溶解能力、黏度和扩散系数，改变分离效能。 应用范围：难挥发、易热解、易氧化等特性的高分子和天然产物的分离和制备。;2) 微型色谱 常规仪器，部件按比例缩小， 仪器的小型化， 便携式的色谱仪 色谱原理和仪器与微制造技术结合 部件和连接系统等环节进行重新设计 不仅是尺寸的缩小，而是技术革新;3) 高速气相色谱 分析速度更快 微填充柱 电子程序压力流量控制系统 耐高压的仪器气路系统 分析速度提高5-10倍，分辨率提高3-5倍。;4) 高温气相色谱 难挥发的化合物(高沸点的脂肪烃) 温度超过300℃ 色谱柱： 聚酰亚胺，330℃ 聚硅氧烷 镀铝层 不锈钢内衬石英，过渡层 ;5) 多维色谱 多个色谱柱串联 色谱柱间的固定相不同 GC-GC，LC-LC，GC-GC 6) 快速扫描色质联用 峰宽小 5/s;7) 毛细管电动色谱 (capillary electroc