色谱绪论10资料.pptVIP

第十七章 色谱分析法概论;一、色谱法的作用、分类和特点;; 当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中各组分与固定相之间作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序从色谱柱中流出。两相及两相的相对运动构成了色谱法的基础。 混合物中的各组分同时进入层析柱顶端，但依次顺序从柱的另一端流出。;2 色谱法分类;3 色谱法特点;§2、色谱流出曲线与术语;1.色谱流出曲线参数 （1）基线 流动相通过检测器时，检测到的信号即为基线。 在理想情况之下，色谱峰形状是正态分布曲线。色谱峰的形状用下述参数描述。 （2）峰高(h) 色谱峰顶到基线的垂直距离。;（3）三种峰宽参数;2.保留值 表示各组分在色谱柱中的滞留状态，是主要的色谱定性参数。 ;（2）用流动相体积表示的保留值;（3） Kovats 保留指数Ix;例：在同一根色谱柱上测出：正庚烷，正辛烷和未知物的调整保留时间分别为14.08s，25.11s和16.32s，试计算它们的保留指数I。;3.分配系数K和容量因子k;(2)分配比 （partition ratio）k;4.容量因子k和调整保留时间的关系;式中，Vm和Vs的意义见前述，二者都为定值。因此，分配系数不同的各组分具有不同的保留值，在色谱图上有不同位置的色谱峰。;色谱分离过程原理小结;5. 分离参数 ：（1）分离度;（2） 相对保留值α;例：用一根固定相的体积为0.148mL，流动相的体积为1.26mL的色谱柱分离A,B两个组分，它们的保留时间分别为14.4min，15.4min，不被保留组分的保留时间为4.2min，试计算：（1）各组分容量因子（2）分配系数（3）A、B两组分选择因子α;6. 吸附等温线及其与色谱峰的对称性;（2）对称因子T：描述峰的不对称性; (1) 在每一个平衡过程间隔内，组分在固定相和流动相之间的平衡可以迅速达到；这一小段间隔的柱长称为理论塔板高度。 (2) 流动相脉动进入，每次进入一个板体积； (3) 试样沿色谱柱方向的扩散可忽略； (4) 各理论塔板上的分配系数相同。;单个组分流经塔板模型色谱柱的运动过程分析 设色谱柱由六块塔板构成，某组分的分配比为1。开始时，设有单位质量的该组分加到1号塔板上，分配达平衡后，1号塔板的固定相及流动相中各分配0.5质量单位的组分。当下一个板体积的流动相以脉动形式加入1号塔板时，就将原流动相中的0.5质量单位的组分顶入2号塔板的流动相中。然后， 1号塔板的固定相中留下的0.5质量单位组分重新在其流动相及固定相中分配，各为0.25质量单位。同样，进入2号塔板的流动相的0.5质量单位组分也在其流动相及固定相中进行分配，各为0.25质量单位。此后，每当一个新的板体积流动相进入色谱柱时，上述过程就重复一次，见下图。按照塔板理论，单个组分流经塔板模型后，其色谱峰形状理论上是正态分布的平滑曲线。;②按照塔板理论，混合组分流经塔板模型后，依据各组分与固定相之间保留作用的不同，而先后流出色谱柱。分配系数K小的组分先流出色谱柱。; 2.理论塔板数和理论塔板高度 色谱柱长L； 虚拟的塔板间距离（理论塔板高度）H：由于在理想情况之下，色谱峰形状是正态分布曲线，标准差σ是峰宽的评价，反映柱分离效能的高低，σ越小，峰形越尖锐，表示分离能力越好，柱效越高，因此，定义理论塔板高度H为单位柱长的方差： H = σ2/L 色谱柱的理论塔板数n：n理论 = L / H 将峰宽用时间表示，理论塔板数为：;3.有效塔板数和有效塔板高度;例：用一根柱长为1m的色谱柱分离含有A，B，C，D四个组分的混合物，它们的保留时间tR分别为6.4min, 14.4min,15.4min,20.7min,其峰底宽Wb分别0.45min, 1.07min, 1.16min,1.45min。试计算各谱峰的理论塔数。;4.色谱分离的塔板理论小结;四、 速率理论（影响柱效的因素）;1. A─涡流扩散项;3. B/u —纵向扩散项（分子扩散项）。由于浓度梯度，试样组分谱带随着流动相前移时，会向谱带前后扩散，导致色谱峰变宽;4. C ·u —传质阻抗项; q为由固定相颗粒形状及孔结构决定的参数。 k为容量因子； DL为溶质在固定液中的扩散系数；df是固定液膜的厚度。;5. 速率理论的要点;五、 色谱分离度方程;影响分离度的因素;分离效果的判断; 例1：在一定条件下，两个组分的调整保留时间分别为85秒和100秒，要达到完全分离，即R=1.5，计算需要多少块有效塔板。若填充柱的塔板高度为0.1 cm，柱长是多少？ 解： α= 100 / 85 = 1.18