动物干细胞培养及__2011.4.27本科生.ppt

第十五章 动物干细胞技术; 主要内容; 序 言 干细胞(stem cells,SC)：是一类具有无限增殖和自我修复能力 (self-renewing)的多潜能细胞，也称为“万能细胞” 。 1999年，Science评价：世界十大科技进展魁首 2000年，Science评价：世界十大科技进展之一 2002年，Science评价：值得关注的六大科技领域之一 2007年，Science评价：IPS(万能细胞) ;动物干细胞技术 指通过各种方法获得干细胞，经体外培养建立细胞系，并对其进行定向分化诱导研究，以期获得需要的某一特定类型细胞。;干细胞研究历史 始于19世纪，至今已有1个世纪。 1896年，Wilson在一篇论述细胞生物学的文献中，首次使用“干细胞”这一概念，专门用于描述寄生虫生殖系的祖细胞。 1981年，Evans和Kaufman用延迟胚胎着床的方法分离胚胎内细胞团，首次成功分离得到小鼠胚胎干细胞。 2007年，科学家将成年小鼠体细胞诱导逆转成干细胞，更加为干细胞技术研究提供了新的思路。 ;干细胞研究意义 (1)干细胞通过核移植或胚胎嵌合，能得到克隆动物，这对提高优良家畜的繁育效率及拯救濒危动物具有重要意义。 (2)由于可以对干细胞进行体外遗传操作、选择和冻存而不失其多能性，所以在特定条件下可诱导分化为人们所需要的细胞、组织和器官等并用于临床治疗。 (3)干细胞技术在生物学基础研究、农业以及移植医学上具有广阔的应用前景，其研究成果必将引起人类临床医学的一场革命。 ;1、干细胞的定义、分类、定位;干细胞的分化及自我更新;;1.2 分类： 1.2.1 根据细胞分化潜能的大小分为 全能干细胞 (totipotent stem cells) 三胚层多能干细胞 (pluripotent stem cells) 单胚层多能干细胞 (multipotent stem cells) 单能干细胞 (monopotent stem cells) ; 全能干细胞：单个细胞如能发育成一个完整的个体，就称该细胞的这种潜能为全能性。 三胚层多能干细胞 ：指细胞失去了发育成完整个体的能力，但仍具有分化成个体中各种细胞的潜能。 单胚层多能干细胞：只能分化成几种特定类型的细胞，如间充质干细胞通常只能分化成骨、肌肉、软骨、脂肪及其他结缔组织，而不能分化为除此之外的其他组织。 单能干细胞：只能分化为一种细胞，如成体干细胞中的神经干细胞，只能分化为神经元，而不能分化为显形胶原或少突胶原，这种细胞称为单能干细胞。; 人受精卵着床前胚胎发育过程; 小鼠精卵着床前胚胎发育过程;桑葚胚（全能干细胞）; 1.2.2 根据细胞来源不同分为 胚胎性干细胞(embryonic stem cell，ES细胞) 成体干细胞(adult stem cells ) ;（1） 胚胎性干细胞 ES细胞：指源于囊胚内细胞团(inner cell mass，ICM)的胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES) 。 EC细胞：从畸胎瘤中分离得到的多能性细胞(embryonic carcinorma cells，EC) 。 EG细胞：胚胎生殖细胞，从早期胎儿原始生殖细胞(primordial germ cells，PGCs )中分离到的细胞(embryonic germ cells,EG）。 均属三胚层干细胞。 ;胚泡（三胚层多能干细胞）;从ICM分离和培养后得到典型的小鼠胚胎干细胞集落（箭头所示）， 周围分散有上皮样细胞。 标尺长度 = 200 μm,（引自Kursad Turksen《Embryonic Stem Cell Protocols》（2nd）,2006）;ES细胞;Embryonic stem cell;（2）成体干细胞定义： 成体干细胞是指一些具有组织特异性的细胞，它们主要用于维持细胞功能的稳定，具有修复和再生能力，能够产生新的干细胞，或者能按一定的程序分化，形成新的功能细胞，使组织和器官保持生长和衰退的动态平衡。 ; 成体干细胞分类： 造血干细胞：存在于骨髓、外周血和脐带血中， 用于治疗血液系统疾病以及多种实体肿瘤。 神经干细胞：存在于中枢神经系统，进一步分化成中枢神经系统的某些细胞类型。 间充质干