[免疫学]实验1分析.ppt

实 验 一;分组、组长 课代表联系方式 ;实验室规则 1．上实验课时，穿好隔离衣。 2．实验室内要保持肃静和秩序，不得谈笑或随处走动，少说、 多做、多想。 3．实验室内禁止饮食和吸烟，关闭通讯工具。 4．用过的实验材料，放于指定地点，不得随意抛置。 5．注意节约实验试剂，爱护实验器材（显微镜、组织切片的使用）。 6．易燃物品（如酒精等）不准接近火源。 7．实验结束后，以小组为单位将实验台整理清洁，值日同学打扫好室内卫生并检查水、电等开关是否关好，离开实验室要关好门窗。;Part I 免疫血清的制备与应用＊（一）：免疫注射;抗体（Ab、溶血素）;【步骤】 1.备皮：家兔背部剪毛。 2.消毒：碘酒、酒精。 3.抽取0.5～1.0mL绵羊红细胞悬液。 4.针头斜面向上，刺入皮内后平行进针使针头没入，推注0.1ml羊红细胞悬液。5～6点注射。 5.注射器以及??毒棉球弃掉，将家兔放回笼子。;Part II 吞噬细胞吞噬功能检测 ;动物：小白鼠。 试验器材：剪刀、镊子、注射器、解剖板、瑞氏染液、载玻片、显微镜等。 抗原：白葡菌菌液。;Mouse handling and manual restraint;1. 取已注射过淀粉肉汤的小白鼠一只，取白葡菌菌液1ml注入其左下腹腔，轻揉腹部。 2. 30min后，将小白鼠拉颈处死，固定，打开腹腔，用玻片在暴露的肠管上印片，自然晾干。 3. 滴加3滴瑞氏染液于印片上，20秒后加等量蒸馏水，混匀染色3min（一直保持湿润）。自来水冲洗，滤纸吸干。 4. 显微镜下观察。 5. 交回实验器材，最后将小鼠，玻片弃掉。;;吞噬有细菌的吞噬细胞;1. 小鼠的抓法，拉颈处死手法，不能伤害动物； 2. 右侧腹腔注射易伤及肝脏；开腹时正中皮肤剪开，沿腹白线，避免伤及血管；印片时避免印到肝脏上； 3. 瑞氏染液与蒸馏水等量，染液完全覆盖印迹，并防止干片； 4. 显微镜的使用。 5. 用品放入指定地点，注意个人防护。;瑞氏染色 10× 40;瑞氏染色 10× 40;Part Ⅲ 免疫器官的组织结构观察;免疫器官;法氏囊（Bursa of Fabricius）;免疫细胞;1.胸腺（Thymus）: 位于胸腔纵隔上部、胸骨后方，分左右两叶，青春期后开始缓慢退化。;胎儿胸腺;胸腺的结构－－－胸腺小叶;胸腺的结构;HE ×100;2.淋巴结（lymph node）;淋巴结的结构;;;;;3.脾的基本结构;脾脏的基本结构:白髓;脾血窦;试验报告： 1.免疫血清的制备与应用：免疫血清制备的原理、注射步骤。 2.吞噬细胞吞噬功能检测的原理、步骤及镜下观察结果 （红蓝铅笔画图）。 （标注典型结构 瑞氏染色 观察倍数1000×/400× ） 3.绘制免疫器官（脾脏，胸腺，淋巴结）的镜下观察结果 （红蓝铅笔画图）。（标注典型结构 HE染色 观察倍数100×）;下次实验内容;