第六章 灭菌.ppt

第六章??灭 菌;控制有害微生物主要有以下几种措施;第一节 灭菌在发酵工业中的作用;1、由于杂菌的污染,使生物反应中的基质或产物因杂菌的消耗而损失,造成生产能力下降。 2、由于杂菌所产生的一些代谢产物,或在染菌后改变了培养液的某些理化性质,使产物的提取和分离变得困难, 造成收率降低或使产品的质量下降; 3、杂菌大量繁殖, 会改变反应介质的pH值,从而使生物反应发生异常变化; 4、杂菌可能会分解产物, 使生产过程失败；; 5、发生噬菌体污染, 微生物细胞被裂解,而使生产失败。 由此可见, 培养基灭菌是否彻底直接关系到生产过程的成败, 轻则导致所需要的产品产量锐减, 质量下降, 后处理困难。重则使全部培养液变质, 导致成吨的培养基报废, 造成经济上的严重损失, 这一点对大规模的生产过程更为突出。; 为了保证培养过程的正常进行,防止染菌 的发生,对大部分微生物的培养, 包括实验室 操作和工业生产,均需要进行严格的灭菌。 工业上, 培养基、发酵设备一般都采用 蒸汽灭菌, 而对空气则采用过滤的方法除菌， 实验室采用硫、甲醛熏蒸等方法灭菌。 ; 第二节 灭菌的基本原理;一、：; 2、辐射灭菌：用于灭菌的主要是放射性Co60产生的γ-射线。 杀菌机理分为直接作用和间接作用： ※直接作用指射线直接破坏微生物的核糖核酸、蛋白质和酶等与生命有关的物质，使微生物死亡。 ※间接作用指射线在微生物体内先作用于生命重要分子周围物质(主要是水分子)产生自由基，自由基再作用于核酸、蛋白质和酶等使微生物死亡，达到保藏食品和灭菌消毒目的。;辐射灭菌应用;辐射处理食品与传统的方法比较的优点：;3、过滤除菌:适合不能干热和湿热灭菌培养基：; 细菌过滤器（孔径0.25-0.45um); 4、干热灭菌： 细胞内各种与温度有关的氧化反应迅速增加,使微生物的致死率增高，工业上用1600C保持1～2小时，达到灭菌目的。玻璃仪器等。;5、湿热灭菌 直接用蒸汽灭菌，蒸汽使蛋白质发生不可逆的凝固变性，使微生物在短时间内死亡。广泛用于工业生产上。 湿热灭菌包括：高压蒸汽灭菌和常压间歇灭菌两种 ; ※致死温度：杀死微生物的极限温度。 ※致死时间：在极限温度下，杀死全部微生物所需时间。 不同的微生物其致死的温度和时间是不同的。通常600C下，保温10分钟可杀死微生物营养体，而芽胞在1000C下，保温十分钟乃至数小时才能被杀死，有些嗜热细菌在1210C下，可耐受20～30分钟;二、灭菌设备?;※立式或卧式灭菌锅较大，多用于原种或少量栽培种培养基的灭菌，一般能装几十瓶或几百瓶;※灭菌柜：与蒸汽锅炉配套，用于大量的原种和栽培种培养基的灭菌，一次能装几百至几千瓶(袋)。但投资太大，适合大型菌种场使用。;2）常压蒸汽灭菌及其设备： 常压蒸汽灭菌锅是用铁锅、砖、水泥砌成的，造价低，适于一般生产单位和专业户使用。大小可根据需要而定，但最大的锅每次装料也最好不超过500公斤。?; 常压蒸汽灭菌，又称间歇灭菌法，分段灭菌法。适用于不耐热培养基的灭菌。 方法是：将待灭菌的培养基在80～100℃下蒸煮15～60分钟，以杀死其中所有微生物的营养细胞，然后置室温或37℃下保温过夜，诱导残留的芽孢发芽，第二天再以同法蒸煮和保温过夜，如此连续重复3天，即可在较低温度下达到彻底灭菌的效果，大规模的固态培养基灭菌采用此方法。; 常压连续灭菌、冷却、烘干设备 采用蒸汽直入与水混合加热进行杀菌，并进行常温水冷却，通过空气加热器将风加热后将袋装物料吹干,以达到烘干效果。广泛应用于各种瓶装、罐装酸性果汁饮料、电解质饮料、酒类、调味品等产品的杀菌冷却;第三节 培养基的灭菌;二、培养基灭菌的类型;2、连续灭菌及其特点： 　１）概念： 　　　在发酵罐外经过一套灭菌设备连续的加热灭菌，冷却后送入已灭菌的发酵罐内的工艺过程。 ２）连续灭菌特点： 　 a、采用高温快速灭菌工艺，营养成分损失较少； b、发酵罐利用率高； c、适合自动控制； d、不适合粘度大或固型物较高培养基灭菌； e、增加了生产环节，增加了染菌的机会。 ; 1、培养基成分：培养基中脂肪、糖分和蛋白质含量越高, 微生物的热死亡速率就越慢, 这是因为在热死温度下, 脂肪、糖分和蛋白质等有机物质在微生物细胞外面形成一层薄膜, 该薄膜能有效保护微生物细胞抵抗不良环境, 所以灭菌温度相要高些。相反高浓度的盐类、色素等的存在则会削弱微生物细胞的耐热性,