第04章病毒总结.ppt

一、病毒的发现和研究历史;二、病毒的定义与特点; 病毒是一类既具有化学大分子属性，又具有生物体基本特征；既具有细胞外的感染性颗粒形式，又具有细胞内的繁殖性基因形式的独特生物类群。;非细胞生物;分类依据;四、病毒的培养和纯化;1）噬菌体的培养;噬菌斑（plaque）：;若标本经过适当稀释进行接种并辅以染色处理，病毒可在培养的细胞单层上形成肉眼可见的局部病损区域，即蚀斑（plaque）或称空斑。;;多角体：;3）植物病毒的培养; 蛋白质提纯方法 （盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、凝胶层析、离子交换等）;第二节 病毒的形态结构与化学组成;一、病毒的形态结构; 核衣壳 核心：DNA或RNA 衣壳：蛋白质 包膜 ： 脂蛋白或类脂糖蛋白 刺突 ;病毒的蛋白质壳体和病毒核酸（核心）构成的复合物。;2）病毒衣壳（capsid）的对称性; 壳体外形如中空的蛋白质圆管，呈坚硬或柔韧状。 由2130个相同的蛋白质亚基（158个氨基酸）以逆时针方向螺旋状排列，形成一个长300nm，内径4nm，外径15nm的刚直中空柱。ssRNA盘绕在壳体内面由亚基形成的沟内，与蛋白质亚基通过弱键结合。;二十面体对称壳体病毒：;（参见P74）;3、 病毒的包膜结构;二、病毒（毒粒）的化学组成; 一种病毒的毒粒只含有一种核酸：DNA或是RNA；;小DNA病毒的基因组为单链DNA，如φX174，M13； 大多数DNA病毒的基因组为双链DNA。;单链病毒核酸有正链（+）和负链（ – ）之分;病毒核酸的特征丰富：;λ 噬菌体线状ds DNA存在12个核苷酸组成的粘性末端， 粘性末端配对可使DNA环化。;病毒结构蛋白的主要生理功能：;病毒的增殖：;一、病毒的复制周期（replicative circle）;病毒吸附蛋白（viral attachment potein,VAP）: 亦称“反受体”;植物病毒：;脱壳：;（1） 核酸的复制、转录;4. 病毒的装配与释放;大多数噬菌体都是以裂解细胞方式释放; 丝杆噬菌体（如M13或fd）不杀死细胞，子代毒粒以分泌方式 不断从受染细胞中释放，并同时完成毒粒的组装。; 有包膜的动物病毒是在从宿主细胞核芽出 或细胞质膜芽出的过程中裹上包膜而形成 包膜病毒。;二、一步生长曲线（one step growth curve）;（参见P72）;效价（titre）或噬菌斑形成单位（plaque-forming unit, pfu）;一步生长曲线;一步生长曲线是研究病毒复制的一个经典试验，最初是为研究噬菌体的复制而建立，以后推广到动物病毒和植物病毒的复制研究中。; 区别： 内裂解：宿主细胞内大量噬菌体分泌酶引起的 细胞裂解，释放大量噬菌体。 自外裂解：胞外噬菌体分泌酶引起的细胞裂解， 没有子代噬菌体的释放。 ;第四节 噬菌体与宿主的关系;温和噬菌体的存在形式有3种：;λ噬菌体的的溶源性反应：;λ噬菌体的溶源性反应：;3. 溶源菌（lysogen或 lysogenic bacteria）;溶源菌的检测方法： 法1：少量溶源菌+大量敏感指示菌+肉汤琼脂培养基 特殊噬菌斑（中央溶源菌菌落，周围透明） 法2：溶源菌经uv照射，进一步培养，滤去培养物中活细菌， 将滤液与敏感菌混合培养，形成透明噬菌斑。;6）溶源转变(lysogenic conversion) ，溶源菌有时还能获得新的生理特性（原噬菌体引起的溶源菌除免疫性以外的其他表形改变，包括细胞表面性质的改变和致病性转变）。;溶源性感染对细胞的影响：;第六节 亚病毒;一、类病毒（viroids）;二、拟病毒（virusoids）;三、朊病毒（prion）;3