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30μL0.2molL的KCl溶液对离体蛙心灌流的影响
30μL0.2mol/L的KCl溶液对离体蛙心灌流的影响
(韶关学院医学院,广东 韶关 512026)
摘要:目的:观察K+对离体蛙心灌流的影响。方法:离体蛙心,并用任氏液灌流,待其稳定收缩后滴入30μL0.2mol/L的KCl溶液,观察心脏活动频率和幅度的变化。结果:灌注KCl溶液后,蛙心停留在最大舒张状态。结论:K+对心脏收缩有强烈的抑制作用。
[关键词] 离体蛙心;KCl;收缩频率;
离体蛙心灌流经过加入KCl溶液后,细胞液k+浓度显著升高,膜内负外正的k+浓度梯度减少,Na+通道失活,心肌细胞兴奋性迅速丧失,从而降低心率,使蛙心搏动停止在舒张期。我们通过用KCL溶液进行心脏灌流,观察KCL对蛙心动作电位波幅的影响,为探讨其作用机制提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 仪器 张力换能器(成都仪器厂),生物信号采集与处理系统(成都仪器厂)。
1.1.2 试剂 任氏液(实验室提供)。
1.1.3 动物 (蛙,28只)(实验室动物房提供),(体重65-75克)。
1.2 实验方法
1.2.1蛙心的制备按照机能实验学1指导的方法暴露蛙心,仔细观察心脏各部分的结构及其舒缩活动的节律性和先后关系。
1.2.2心脏插管,用Straub法2对蛙心进行插管,并用任氏液反复灌洗心脏内的余血,直到无残留液为止以防止血液凝固而影响实验正常进行。
1.2.3装置安装,用试管夹将插管固定在铁支架上,并将蛙心夹的连线绕过滑轮与张力换能器应变簧片相连,连线应与地面垂直,将张力换能器输出线连接在生物信号采集与处理系统输出通道上。
1.2.4 打开RM6240USB2.0S I 版程序,选择实验→循环→蛙心灌流,使用动态测量法记录正常跳动时的波形及数据。在离体蛙心新鲜任氏液中加入30μL0.2mol/L的KCl溶液,选择静态测量法观察并记录心搏曲线及心肌收缩强度和心率的变化。待心脏停止收缩后换洗任氏液直至离体蛙心恢复正常跳动为止,重复一次实验。
1.2.5 实验数据汇总,分析数据,并记录于表内。
1.3 统计学处理
所有数据均用±s表示。采用统计软件SPSS 13.0进行统计处理,两组间数据比较采用两独立样本的t检验,多组间数据比较采用单因素方差分析。P 0.05表示差异有显著性。
2 结果
增加了kcl溶液后,离体蛙心动作电位波幅降低,处理组的心率比对照组要低。经过统计学分析,对照组和处理组的收缩末期张力和舒张末期张力有显著差异,收缩末期张力的P 0.004,舒张末期张力的p 0.011.对照组和处理组的心率没有差异,它的p 0.033.
kcl对离体灌流蛙心的影响(±s)
组别 收缩末期张力 舒张末期张力 心率 对照组
处理组 1.84
0.78 0.30
0.21 18.13
17.08 3 讨论 关于KCL对离体灌流蛙心影响,通常认为KCL对心肌细胞的兴奋有抑制的作用。实验表明,一定浓度的KCL对心肌细胞的收缩末期张力和舒张末期张力有显影响,对心率没很大差异,这可能与增加k+的浓度,细胞液k+浓度显著升高,膜内-外k+浓度梯度减少,Na+通道失活,心肌细胞兴奋性丧失,从而降低心率了。
参考文献:
[1]张轩萍,牛栓成.蛙心起搏点和期前收缩于代偿间歇的观察[M]∥袁秉祥,闫剑群.机能实验学.第二版.北京:高等教育出版社,,2006:71
[2] 张轩萍,梁月琴.离子及药物对离体灌流蛙心的影响[M]∥袁秉祥,闫剑群.机能实验学.第二版.北京:高等教育出版社,,2006:74
作者简介:陈钰欣(1990-?),女, 广东肇庆人,韶关学院医学院在读本科学生。
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