秸秆类生物质暗发酵产氢关键参数优化和其机理研究.pdf

要摘氢能因其具有高效、清洁、无污染的特点被公认为最具发展前景的能源之一。在诸多的制氢方法中，生物制氢因其能够在常温常压下操作而备受关注。与光合制氢相比，暗发酵制氢具有产氢速率高、不依赖光照、设备简单、易操作、能够实现废弃生物质资源化等特点而最具产业化前景。目前，该技术普遍存在产氢率低、发酵底物成本高等问题，成为制约暗发酵制氢产业化的主要技术瓶颈。基于此，本文在探寻天然菌源预处理方法的基础上，从高效生物制氢反应器中分离、筛选得到一株底物利用范围广的高效兼性厌氧菌，对其产氢特性进行了研究，并从生化工程的角度对其中的??产氢途径进行调控；之后，从降低运行成本的角度，筛选分离在中温条件下能够直接利用未经过预处理的秸秆类生物质高效发酵产氢的微生物，进行菌种鉴定及相关的产氢特性研究。具体内容如下：??窖靶碌木?丛ご?矸绞健?系统考察了微波辐射预处理对混合菌源产氢性能的综合影响。结果显示：采用微波辐射对牛粪堆肥进行预处理，能够有效抑制或杀灭嗜氢茵，而保留产氢菌的活性。以??疞酸解玉米秸秆为底物，利用微波辐射????ご?淼呐?粪堆肥为菌源，在???添加量???／?現?砑恿???／?保??饬孔?大，达到????／?Ｓ肫渌??丛ご?矸绞较啾龋?梅椒ú僮靼踩?虻ィ?芎?低，耗时少，且菌源产氢能力更高。通过???鞍着ǘ炔舛ê蚉????际跹芯苛宋⒉ǚ?渥饔没?碓?于：微波辐射能够对茵源中微生物细胞壁造成不同程度的损伤和破坏，进而影响微生物细胞的通透性；此外，微波还能对微生物的基因组??斐刹煌?潭?的损伤，由此导致对微波辐射敏感的嗜氢菌的失活或杀灭；而主要的产氢菌形成的芽孢具有极强的耐辐射和耐热能力，短时的微波辐射不会对其造成损伤，产氢菌的活性得以保持。??由?镏魄夥从ζ髦蟹掷氲玫揭恢旮咝Ъ嫘匝嵫醪?饩?Ｊ紫榷云浣??形态学特征及生理生化特性研究，结合菌株????序列分析，确定该菌株的种属分类。对菌株产氢特性进行研究：菌株????氮源产氢。以葡萄糖为底物时，最大产氢量为?????痬?。发酵液的初始?和?芾?枚嘀痔肌?摘要?．??? 培养温度对菌株产氢活性有影响，初始???????8镁?址⒔筒?饨衔J室?的条件。在单因素实验的基础上，采用????????匝樯杓品?跋煊γ娣治?法对菌株??????．???发酵产氢条件进行优化。首先采用????—???试验设计法筛选出影响菌株产氢的主要因素：葡萄糖浓度、牛肉膏浓度和磷酸缓冲液浓度。在此基础上，利用最陡爬坡路径大致确定最大响应区域，最后利用????胁试验设计及响应面法进行回归分析。结果表明，三个主要因素的浓度变化显著影响氢气产量。通过求解回归方程，确定最优产氢条件：当葡萄糖浓度?．????Ｈ飧嗯ǘ?．??疞，磷酸缓冲液浓度?．???／?保?馄?产量达到理论最大值??．??／??导什?饬看锏??????訠?????．???中??产氢途径进行强化。首先，在培养基中使用与葡萄糖结构类似，氧化还原状态不同的底物作为碳源进行发酵产氢试验，确定???胞内存在??产氢途径。采用丙酮酸脱氢酶系?抑制剂对菌源产氢过程进行干涉，以期能够充分发挥??产氢途径的作用。首先考察了抑制剂浓度对兼性厌氧纯菌和混合菌源发酵产氢量的影响。之后，考察了特定浓度抑制剂的添加对兼性厌氧纯菌和混合菌源产氢性能的综合影响。结果发现，添加适量的抑制剂能够有效提高发酵体系的氢气产量，同时降低体系中乙酸和丁酸等副产物的生成，降低了后续发酵废水的处理难度。??永?蒙?衩捉崭蜒被?纳?镏魄夥从ζ髦蟹掷氲玫揭恢昴芄辉谥形绿?件下，不经过底物预处理，高效利用生玉米秸秆发酵产氢的细菌。根据其形态学特征及生理生化特性，并结合菌株????序列分析，确定菌／／朱??闹质舴?类。菌株???????．??芾?枚嘀痔荚床?狻Ｒ陨?衩捉崭押退峤饨崭盐?底物时，产氢量分别为?．?????／?????，初步判断该菌株能够直接利用秸秆中的半纤维素产氢。在单因素实验的基础上，采用响应面分析法对?．??⒔筒?馀嘌???杏呕?＠?肂?—?????式验设计及响应面分析法进行回归分析。结果表明，碳酸氢铵、磷酸二氢钾和营养液的浓度变化能够显著影响氢气产量，通过求解回归方程得到如下结论：当生玉米秸秆浓?篊??妓崆怙?ǘ?．??疞，磷酸二氢钾浓度????疞，营养液的添加量为?／?保?馄??看锏嚼砺圩畲笾????／??导什?饬看镏?????．??魑D芄辉谥形绿跫?轮苯永?孟宋?乩嗌?镏史⒔筒?獾?度?摘要?／?????????．?? 优良菌种，在生物制氢中有较好的应用前景。关键词：菌源预处理；微波辐射；产氢菌筛选；?????．；??；生玉米秸秆；??????摘要?．Ⅱ? 摘要? 嗽．???????????????猳????????甌????甌???甌??????????????????．????甌??琲???