第七章化学酶工程介绍.ppt

第七章 化学酶工程;前言;;7.1. 酶化学修饰;酶修饰的方向;;酶分子化学修饰的基本要求;1．酶性质的了解;2．修饰剂的选择;3．修饰反应条件的选择;4. 修饰反应的定性定量检测;7.1.1—7.1.2 小结;7.1.3 酶分子化学修饰的方法;1. 酶分子侧链基团的化学修饰 ;一．几种重要的修饰反应;2．烷基化反应 ;3．氧化和还原反应 ;4．芳香环取代反应 ;二．特定氨基酸残基侧链基团的化学修饰 酶分子侧链上的功能基团：氨基，羧基，巯基，咪唑基，胍基，吲哚基，酚基，羟基，硫醚基，二硫键。;1．氨基的化学修饰--赖氨酸侧链ε-氨基是酶分子中亲核反应活性很高的基团。 ;2．羧基的化学修饰 ;3．巯基的化学修饰：具有很强的亲核性;可溶性的N -乙基马来酰亚胺敏感型融合蛋白受体； 定位在高尔基体中，通过膜泡融合调节内体运输。 ;4．咪唑基的化学修饰 ;5．胍基的化学修饰 ;6. 二硫键的化学修饰;三. 研究热点-核酸类酶的修饰 ;7.1.3 结束;;;;;;;;;7.1.3 酶分子化学修饰的方法;酶分子的亲和标记;7.1.3 酶分子化学修饰的方法;有机大分子对酶的修饰;常用的大分子修饰剂 ;聚乙二醇（PEG）;糖肽;具有生物活性的大分子物质—蛋白质类修饰;常用修饰方法;戊二醛法;活性酯法;活性酯法介导白蛋白修饰酶的反应过程：a 白蛋白琥珀酰化 ;b 活性酯形成反应 ;c 修饰反应 ;大分子结合修饰;7.1.3 酶分子化学修饰的方法;交联剂：具有两个活性反应基团的双功能试剂，可在酶分子内相距较近的两个氨基酸残基直接形成共价交联，使酶分子空间构象更稳定。 交联酶晶体制备;扩充知识点—金属离子置换修饰;举例;金属离子置换修饰的过程;;7.1.1—7.1.2 小结;7.1.3 酶分子化学修饰的方法;化学修饰（广义）;7.1.4 化学修饰酶的特性;1．热稳定性;热稳定性举例：;二．抗原性;3．体内半衰期;4．最适pH;5．酶动力学性质;6．对组织的分布能力变化;6．对组织分布能力变化举例;超氧化物岐化酶经丁二胺修饰后，血脑屏障和血神经屏障的透过 能力显著增强，对由自由基引起的脑及神经疾病有治疗作用。 ;7.1.4 结束