新型光学成像技术及其在生物医学中的应用.doc

姓名学号张雄 2008301220041新型光学成像技术及其在生物医学中的应用提要： 提要：本文介绍了在生物医学中有广泛应用前景的共焦扫描光学显微镜、扫 描近场光学显微术和光学相干微术三种新型成像技术的基本原理和应用。关键词： 关键词：共焦扫描光学显微镜，扫描近场光学显微术，光学相干显微术，成 像New image technologies and their applications in biomedical field Shen Bin1 Li Jia2 Zhang Yanjun2 Li Ning2 300052)(Tianjin Medical College of Health Workers,Tianjin (Photonics Center,Nankai University,Tianjin300071)Abstract:This paper presents the basic principles of confocal scanning optical microscope,scanning nearing-field optical microscopy and optical coherence microscopy and their application,they have enormous potential in biomedical field.Key words:confocal scanning optical microscope,scanning near-field optical microscopy,optical coherence microscopy,image生命科学是21世纪科技发展的最大热点之一，而光与生命有不解之缘。早期 的光学显微镜就为生命科学的研究提供了十分有用的工具。 但由于生物组织的极度不均匀性， 形成了对光波的强烈的散射作用， 加之生物组织对光波的强烈吸收， 致使光波无法深入到生物组织，也就不能从生物组织中取出清晰的图像。随着光 子学的骤然兴起，近年来科学家们研制了一系列光学与光子学取像方法，本文对 此做简要介绍。1共焦扫描光学显微镜〔1 〕共焦扫描光学显微镜(Confocal Scanning Optical Microscope,CSOM)具有许多常规显微镜所没有的特性。 它只允许由处在焦平面上的样品薄层的反射光通过 目镜而被观察和记录，因此得到的是样品中一个薄层图象。图像具有高的对比度 和高的分辨率。共焦扫描光学显微镜的共焦特性可以由图1来说明。在图1(a)中，系统被精 密调准时，由光源通过光阑孔射出的光，经物镜形成受衍射限制的光点，此光点 照射位于物镜焦平面上的样品中的一点， 由此点反射回来的光线再次通过物镜及 其后的观察孔光阑被其后的探测器所探测，即可获得共焦图像。被光源照射的光 阑起点光源作用，观察孔光阑及其后的探测器起点探测器作用。如果当观察样品 的对象移出焦平面，其反射光线来自物镜的焦平面的上方或下方的物体的反射， 这些反射光线经物镜后不能被聚焦到观察孔光阑里去，而被散焦到其孔光阑之 外， 如图1(b)所示。 使此孔光阑后面的探测器上的接收信号的幅值将迅速的减小， 从而使获得的图像具有好的对比度和高的分辨率。图1共焦扫描光学显微镜光路示意图(a)扫描对象位于物镜焦平面上(b)扫描对象位于物镜焦平面外共焦扫描光学显微镜特别适用 于生物组织的研究， 因为它可以消除用普通显 微镜观察时出现的模糊。 模糊的典型诱因是观察的焦平面之外的样品的扫描光线 引起的。共焦扫描显微镜产生的图像不接收所有焦平面之外的光线，这样就消除 了模糊。此外由于共焦显微镜能对细胞和组织做光学上的切片，这样获得的图像 就能消除表面荧光对焦点图像的干扰， 用于揭示细胞所标记的免疫荧光信息能够 被清楚地显示出来。图2(b)为普通显微镜下的白血细胞荧光图像，(a)为共焦显微 镜下的荧光图像。图2白血细胞图象(a)共焦显微镜下的荧光图像(b)普通显微镜下的荧光图像2扫描近场光学显微术扫描近场光学显微术(Scanning Near-field Optical Microscopy,SNOM)是在近 场探测原理的基础上发展起来的一种光学扫描探针技术， 其分辨率突破了光学衍 射极限，可达10～200nm。SNOM 原理是采用一亚波长尺寸的光学探针作为光源和探测器。当一个亚 波长孔径的微小光源在物体的近场范围内照射时， 照射光斑的面积只和孔径大小 有关而与波长无关。把探针置于物体的近场区域(＜100nm)，反射光或投射光中 将携带物体亚波长尺寸结构的信息，通过扫描采集样品