鸭大肠杆菌病病原分离与药敏实验分析.pptVIP

鸭大肠杆菌病病原分离鉴定与药敏试验 论文的结构和主要内容 第一部分 实 验 背 景 第二部分 实 验 方 法 第三部分 实 验 结 果 第四部分 结 论 一、实验背景 近几年随着养殖业迅速发展和集约化程度的大大提高，大肠杆菌病流行势头愈加迅速。 大肠杆菌病是在世界范围内影响养殖业发展的主要细菌病之一， 常招致巨大的经济损失，有效防治大肠杆菌病一直是养殖业的一项重要课题。2013年10月泰州市海陵区某养殖户所饲养的肉鸭开始发病，用药治疗几天不见效果，户主立即携带病死鸭至xxxx动物医院进行诊疗，门诊初步诊断结果为鸭大肠杆菌病，还要通过实验室进一步确诊。 二、实验方法 2.1病料采集 采集送检病死鸭，无菌取心脏和肝脏。 2.2分离培养? 以无菌操作的方法，将采取的病料，分别接种在普通琼脂平板、麦康凯琼脂、伊红美兰琼脂培养基中37℃恒温箱培养。 2.3镜检 挑取光滑、砖红色的单个菌落涂片，革兰氏染色镜检，观察记录菌体形态和染色特征。 2.4生化实验 将各株细菌分别接种到用于鉴定的生化反应管中 二、实验方法 2.5致病性实验 动物试验将分离菌接种于营养肉汤，于37℃恒温培养箱中培养24h。取健康小白鼠6只，分为A、B两组， A组3只，腹腔接种营养肉汤菌液，每只0.2mL；B组3只，腹腔接种等量的灭菌生理盐水作对照组，分别隔离饲养观察。 2.6药物敏感试验 将培养16-24h营养琼脂上的菌落接种于普通营养琼脂培养基表面涂布均匀，将接种的平板置室温下干燥3-5min后用无菌镊子取含各种药物的药纸片紧贴于琼脂表面，置35℃恒温箱内16-18h后，观察结果。 三、实验结果 麦康凯培养基 菌落边缘整齐或波状，稍凸起，表面润滑直径1.5-2.0mm,呈粉红色或深红色。如图： 伊红美蓝培养基 菌落圆形，呈蓝紫色，中心为紫黑色，带金属光泽。如图： 肉汤培养基 菌落大，直径1.5-2.0mm，形成凸起光滑湿润，灰白色，半透明，边缘整齐并常有特殊的粪样臭味 三.实验结果 三、实验结果 3.4 致病性实验　　 小白鼠试验结果：接种36h内A组小白鼠全部死亡，剖检可见肝肿大、表现出点状出血和灰白色坏死灶，脾脏瘀血，肺脏出血等明显病理变化，从死亡小白鼠的心、肝、脾等病料中均能回收到接种菌；B组小白鼠饲养1周后全部存活，剖检无病理变化。 动物试验结果表明：此次分离出的细菌对小白鼠有较强的致病性 三.实验结果3.5药物敏感试验 四.结论 本试验从可疑病鸭分离到可疑菌经形态学及培养条件观察、生理生化实验分析鉴定，鉴定为鸭大肠杆菌的感染，经动物试验表明该分离菌株有较强的致病性。 大肠杆菌病是一种常发病，但是却难于控制，这不仅因为其血清型多，各血清型间无交叉保护性，而且不同血清型对药物的敏感性不一致。不同地区的大肠杆菌对药物敏感性也各不一致。本次药敏试验结果表明分离菌对舒巴坦、阿奇霉素、、头孢曲松、卡那霉素高度敏感，而对头孢吡肟、阿莫西林-棒酸、头孢氨苄、环丙沙星中度敏感，而对氧氟沙星、复方新诺明、链霉素、庆大霉素、氨苄西林、克林霉素、诺氟沙星、等药物表现为耐药性，对万古霉素，青霉素，四环素，红霉素，阿莫西林，苯唑西林，氯霉素，克林霉素药物不敏感。表明当地鸭大肠杆菌分离株对常见的药物均有较强的耐药性。 谢谢大家！ * * 3.1 细菌的分离培养 三.实验结果 3.2 形态学观察? 　　经镜检可见到革兰氏阴性菌，两端钝圆，有长约1.5～3.O微米的短小杆菌，偶有2～3个菌体相连，无芽孢。见图： 3.3生化鉴定 将分离到的菌株，经生化试验鉴定，分解葡萄糖、麦芽糖、甘露醇产酸产气不分解蔗糖,MR试验呈阳性，VP试验为阴性，吲哚试验阳性，硝酸盐试验阳性，枸橼酸盐试验阴性，硫化氰试验阴性。此结果符合大肠杆菌的特征，见表1： — 尿素酶 + 硝酸盐 — 硫化氢 — 蔗糖? + 甲基红MR试验 ⊕ 麦芽糖 + 靛基质（吲哚） ⊕ 甘露醇 — VP试验 ⊕ 葡萄糖 — 构椽酸盐 ⊕ 乳糖 试验结果 生化试剂? 试验结果 生化试剂? 不敏 0 红霉素 不敏 0 四环素 不敏 0 苯唑西林 耐药 8.5 链霉素