实验11氨基酸的薄层层析分离与鉴定.docVIP

实验11 氨基酸的薄层层析分离和鉴定 一 实验目的 1．理解薄层层析原理， 2．掌握薄层层析技术， 3．学会氨基酸的较为精确的定性。 二 实验原理 1 层析技术，亦称色谱技术，是一种物理的分离方法。它是利用混合物中各组分的物理化学性质的差别 如溶解度、吸附能力、分子形状和大小、分子极性 ，使各组分在两个相中的分布不同，其中一个相是固定不动的 称为固定相 ，另一个相则流过此固定相 称为流动相 并使各组分以不同速度移动，从而达到分离。 2 固定相：可以是固体物质（如吸附剂，凝胶，离子交换剂等），也可以是液体物质（如固定在硅胶或纤维素上的溶液） 3 流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或超临界体等，都称为流动相。柱层析中一般称为洗脱剂，薄层层析时称为展层剂 。 4 层析技术利用 分离混合物 一些结构类似、理化性质也相似的化合物组成的混合物，一般应用化学方法分离很困难，但应用色谱法分离，有时可得到满意的结果。 鉴定化合物 在条件完全一致的情况，纯的化合物在薄层色谱或纸色谱中都呈现一定的移动距离，称比移值（ R f 值）， 所以利用色谱法可以鉴定化合物的纯度或确定两种性质相似的化合物是否为同一物质。但影响比移值的因素很多，如薄层的厚度，吸附剂颗粒的大小，酸碱性，活性等级，外界温度和展开剂纯度、组成、挥发性等。所以，要获得重现的比移值就比较困难。为此