实验八微生物的分离纯化和平板菌落计数(二)2.pptVIP

实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数（二） 一、目的要求 ? 1. 了解分离与纯化微生物的基本原理及方法。 ??2. 掌握倒平板的方法和平板划线分离的基本操作技术。 二、基本原理? 由于在自然界中的微生物是各种类微生物的混合体，因此，为了研究某微生物的特性，或者要大量地培养和利用某微生物，必须把它们这些混杂的微生物群中分离出来。从而获得某一菌株的纯培养。这种获得纯培养的方法称为微生物的分离和纯化。 为了获得某微生物的纯培养，一般是根据该微生物对营养，酸碱度，氧等条件要求不同，而供给它们适宜的生活条件，或加入某种抑制剂造成只利于此菌生长，而抑制其他菌生长的环境，从而淘汰其它杂菌，再通过各种稀释法（平板稀释法，平板划线法等），使它们在固体培养基上形成单菌落，从而得到纯菌株。 三、器材? 肉汤蛋白胨培养基；伊红美兰培养基。 ?盛9毫升无菌水的试管；无菌吸管；无菌培养皿；样品等。 四、操作步骤? 1. 平板菌落记数法（又称倾注法）： ????（1）制备稀释液：用1毫升无菌吸管吸取一毫升样品注入盛有9毫升无菌水的试管中，吹吸三次，并振摇使之充分混匀。然后再用一支吸管从此试管中吸取一毫升注入另一盛有9毫升无菌水的试管中，以次类推制成10-1、10-2、10-3、10-4、10-5……的各种稀释度的土壤溶液。  （2）滴加菌液：0.1ml （3）倒培养基：牛肉膏蛋白胨