实验六细胞核的分离和核酸的鉴定.pptVIP

* 实验6 细胞核的分离与核酸的鉴定 （Separation of cell nuclei and identification of nucleic acids） 遵义医学院生物化学教研室 曹桂群 1.掌握离心技术的原理及离心机的使用； 2.熟悉提取分离细胞核、细胞质的方法； 3.熟悉鉴定核酸的方法； 一、分离细胞质与细胞核 　１.破碎细胞 细胞破碎的方法 机械法 高速组织捣碎机 玻璃匀浆器 研钵 物理法 超声匀浆器 冻融法 化学法 自溶法 酶处理 表面活性剂处理法 利用各细胞器在一定介质中的沉降速度的差异，可采取离心的方法，将细胞器分离出来。 ２.离心技术 细胞器沉降先后顺序先后是细胞核、线粒 体、溶酶体和其他微体、核糖体和大分子。 离 心 方 法 差速沉降离心法 速率区带离心法 等密度区带离心法 密度梯度区带离心法 √ √ 差速沉降离心法 (differential centrifugation) 采用逐渐增加离心速度或低速和高速交替进行离心，使沉降速度不同的颗粒，在不同的离心速度及不同离心时间下分批分离的方法。