参考资料--氟硼二吡咯叶酸光敏剂的制备及其体外光动力活性研究.docVIP

氟硼二吡咯-叶酸光敏剂的制备及其体外光动力活性研究 Mei-Rong Ke, Sin-Lui Yeung, Dennis K. P. Ng,,Wing-Ping Fong,and Pui-Chi Lo 香港中文大学，生命科学学院，化学系。 文摘：制备了两种共轭体系延长的氟硼二吡咯光敏剂并用各种光谱分析方法进行了表征。相比于人类乳腺癌MCF-7细胞，这些偶联物对高表达叶酸受体的人类鼻咽癌IC50值(0.06μM)IC50值也会影响他们的亚细胞定位化合物11对KB细胞的内网显示高亲和力,11 b则主要是1-4已成为学术界的研究热点，除了经典的四吡咯衍生物，如卟啉、卟吩、脱镁叶绿酸和酞菁，氟硼二吡咯（BODIPY）衍生物也有成为光敏剂的希望，这归因于它们可通过化学方法改变π骨架获得理想的光学及光物理性质，以及即使在水介质中也具有的相对高稳定性。然而这一领域的研究并没有被充分地发展起来。如最近的两篇评述文章所报道的，大部分的BODIPY光敏剂仅限于吸收带在近红外区的硫唑嘌呤-BODIPY，而那些非硫唑嘌呤类BODIPY则很少被研究，尽管它们在被适当修饰后吸收带也位于近红外区，并表现出优越的光动力活性，而且在内消旋位置也可以引入一个额外的功能我们最近报道了一系列聚乙二醇联苯乙烯BODIPY衍生他们的细胞摄取、亚细胞定位和受苯乙烯基取代基影响。作为本研究的扩展,在此我们报告两个内消旋位置与叶酸通过三唑环桥链,包括他们的制备和体外光动力活。一个常见的策略是通过直接结合配体,如单克隆抗体、蛋白质,多肽,类固醇和叶酸。他们的低分子量、高稳定、高组织渗透性,和大多数上皮癌脱镁叶绿酸我们相信,通过叶酸苯乙烯组联BODIPY表现出强的肿瘤选择性,。 Knoevenagel缩合反应与对三乙二醇苯甲醛632反应得到联苯乙烯BODIPY化合物7a和7b。这一可延长π共轭吸收转红色,从而光渗透到组织中。这两个同分异构体的比例约7，这是由于叶酸的γ-羧基的空间位阻较小，反应活性高因此以酰胺在γ位的产物（如线路图1中所示）为主，这与其他文献的报导相符。20,33,34这两种混合物未经分离，直接与炔基联苯乙烯BODIPYs 7 a和7 b电子吸收及光物理性质F）为0.20，相对于未取代锌（II)酞菁(ZnPc) (ΦF = 0.28)35，这些化合物的荧光发射较弱，这归因于两个碘原子促进了系间窜越并减少了通过荧光发射弛豫的可能。36其电子吸收和荧光数据如表1所示。 为检测这些化合物的光敏效率，我们在DMF中用1,3-二苯基异苯并呋喃(DPBF)ZnPc是相当的。 2.3体外研究 化合物11a和11b体外光动力活性是以高表达叶酸受体(FR+)37的人类鼻咽癌KB细胞(FR-)38的MCF-7细胞为受体研究的。其剂量-生存曲线如图1所示。这两种化合物在黑暗环境中基本没有细胞毒性，而在光照下则都呈现出了细胞毒性。11a的光细胞毒性强度（对KB细胞的IC50 = 0.06 μM，对MCF-7 细胞的 IC50 = 2.56 μM)和11b的光细胞毒性强度（对KB细胞的IC50 = 0.18 μM，对MCF-7 细胞的 IC50 = 1.00 μM)明显随细胞种类而变，相比之下，光毒性更强的不含叶酸的BODIPY7b其差别较小（对KB细胞的IC50 = 0.02 μM，对MCF-7 细胞的 IC50 = 0.06 μM)。一般来说，KB细胞较MCF-7细胞更易受光动力作用影响。值得一提到的是，11a对这两种癌细胞的光毒性强度的差别非常大，其对KB细胞的IC50值比MCF-7细胞低了43倍，而化合物11b只低了6倍，7b只低了3倍。这些结果表明这两个叶酸修饰的光敏剂11a和11b对FR+KB细胞展现了更高的亲和力，其选择性和光细胞毒性强度依赖与介于光敏剂和叶酸之间的乙二醇链的长度，乙二醇链较短的偶联物11a表现出对KB细胞更强的靶向性和更高的光细胞毒性。 连接链对其他一些叶酸修饰的抗肿瘤药剂的影响也被研究过。17,39,40例如Guaragna等人制备了两种分别通过氨基乙基和伪β-缩二氨酸连接叶酸的抗癌药物苯丁酸氮芥苯丁酸氮芥Schneider等人报道的两种叶酸-卟啉偶联物，17发现连接链为乙二醇基的化合物比另一个连接链为烷基的化合物显示出更强的光细胞毒性，它们的半抑制光剂量值相差三倍。我们的研究结果表明，对于叶酸偶联物，即使性质相同，连接链的不同长度也会对其特异性和细胞毒性产生显著的影响。 为了进一步揭示叶酸基团的靶向作用，我们进行了对照实验，将FR+KB细胞与11a（0.06μM，即其IC50值）和游离叶酸（0.50μM）共培养24h，然后进行光动力疗法实验。发现细胞存活率从50%上升至94%，这一结果清楚地表明增加游离叶酸会减少细胞对11a的摄取，从