(公开课)动物细胞融合与单克隆抗体修改要点.ppt

(1) (1) (2) (3) (4) (5) 植物体细胞杂交过程示意图 一、动物细胞融合技术 比较项目 细胞融合的原理 细胞融合的方法 诱导手段 用途 植物体 细胞杂交 细胞膜的 流动性 纤维素酶、 果胶酶去除 细胞壁后诱 导原生质体 融合 离心、电刺 激、振动、 聚乙二醇 克服远源 杂交不亲 和，获得 杂种植株 动物细 胞融合 细胞膜的 流动性 用胰蛋白酶 使细胞分散 后诱导细胞 融合 除应用植物 细胞杂交手 段外，还有 灭活病毒 获得杂种细胞、制备 单克隆抗 体 比较动、植物细胞杂交技术 【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 （ ） A.离心 B.灭活的病毒 C.电刺激 D.振动 【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点（ ） 具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B.能无限增殖 C.可形成新个体 D.培养过程会贴壁 【例3】动物细胞融合的作用中最重要的是（ ） A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞 B B A 二、单克隆抗体 抗体的传统生产方法 抗原 反复注射动物 从动物的血清中分离抗体 ①为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白？ ② 会有几种融合方式？ ③ 杂交瘤细胞是如何筛选出来的？有何特点？ ④ 是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一性抗体？ ⑤ 如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体？ BB 、B瘤 、瘤瘤 （一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活 获得产生相应抗体的B细胞 （二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞 √ 体外培养 小鼠腹腔内培养 杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能大量增殖。 单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是？ 【例4】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ） A.经过免疫的B淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 B.不经过免疫的T淋巴细胞 D.不经过免疫的B淋巴细胞 【例5】单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的 （ 　） B淋巴细胞 　 B．T淋巴细胞 C．骨髓瘤细胞 D．杂交瘤细胞 A D 【例6】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（ ） A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞 B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D．筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体 B × 两个过程 动物细胞培养过程 单克隆抗体制备过程 三个“一” 一个诱导细胞融合的新方法 －－灭活病毒 一个新细胞－－杂交瘤细胞 一个优势－－单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势 (1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自小鼠体内的 细胞，从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射_____________类物质。 （2）d过程是一个_____________过程，该过程的进行常用_____________或_____________的诱导。 (3)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成 种类型的C细胞，因此需用__________培养基筛选出D细胞用于培养，D细胞的名称是 ，其特点是_________________________________________。 效应B 抗原 细胞融合 聚乙二醇 灭活的病毒 　选择性 　 3 既能无限增殖又能产生特异性抗体 杂交瘤细胞 (4)在培养时通过________分裂方式大量繁殖。D细胞体外培养需要注意的条件是（要求答5项）__________________________________。 （5）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是_________________。 特异性强、灵敏度高 有丝 无菌、无毒的环境；充足的营养；适宜的温度和pH；适宜的气体环境 15、（1）单克隆抗体是指 。 （2）制备单克隆抗体的步骤： ①将__________注入小鼠体内，从小鼠脾脏中获得淋巴细胞，其中至少1个淋巴细胞带有抗该抗原的抗体。 ②将步骤①获得的B淋巴细胞与步骤②培养的骨髓瘤细胞在_________________的诱