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实验1:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 ①还原糖 + 斐林试剂 砖红色沉淀 ②脂肪 + 苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液→橘黄色(或红色) ③蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色 ④淀粉 + 碘→蓝色 水浴加热 一、可溶性还原糖的检测: (1)原理:还原糖 + 斐林试剂 砖红色沉淀。 水浴加热 还原糖:主要是葡萄糖、果糖和麦芽糖。 蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。 含糖量较高,颜色为无色或近于无色的植物组织。 (2)选材:苹果、梨 (3)试剂:斐林试剂 甲液:质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液 乙液:质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液 等量混合,现用现配 还原糖的检测结果 Cu2O↓(砖红色) 砖红色的糖(还原糖)非(斐林试剂)常好吃 二、脂肪的检测 (1)选材:经浸泡去种皮的花生种子。 (2)检测过程: 制片 选取最薄的切片置于洁净的载玻片中央 制成临时装片:滴1?2滴蒸馏水,盖上盖玻片 染色:在薄片上滴加2?3滴苏丹Ⅲ染液,染色2?3min 洗去浮色:用吸水纸吸去染液,滴加体积分数为50%的酒精1?2滴 镜检观察:在低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒,然后用高倍镜观察。 切片:花生种子(浸泡3-4h),去皮,将子叶削成薄片。 橘黄色小圆颗粒即为脂肪颗粒 苏三(苏丹Ⅲ)送了我一个橘黄色的胭脂(脂肪) 三、蛋白质的检测: (1)原理:蛋白质 + 双缩脲试剂 紫色络合物 (2)选材:黄豆、鸡蛋清(稀释)、牛奶、豆浆 (3)试剂: 双缩脲试剂 双(双缩脲)子(紫色)弹(蛋白质) 在碱性条件(NaOH)下,蛋白质中的肽键 (—NH—CO—)与Cu2+作用生生紫色络合物。 A液:质量浓度为0.1g/mL NaOH B液:质量浓度为0.01g/mL CuSO4 先加A液后加B液 注意事项: (1)如果用鸡蛋清作为材料,则必须进行充分稀释,否则反应后的产物会粘固在试管内壁上,使反应不彻底,且试管不易洗刷干净。 (2)过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应,使溶液呈蓝色,而掩盖生成的紫色。 鉴定物质 生物材料 所用试剂 颜色变化 还原糖 脂肪 蛋白质 淀粉 苹果、梨 斐林试剂 砖红色沉淀 花生种子 苏丹Ⅲ染液 苏丹Ⅳ染液 橘黄色 红色 豆浆、牛奶、鸡蛋清 双缩脲试剂 紫色 面粉、马铃薯匀浆液 碘液 蓝色 注:鉴定还原糖需加热;脂肪的鉴定不一定要用显微镜,要观察脂肪颗粒,则必须用显微镜。
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