2.蛋白质要点.ppt

本章内容 2.1 蛋白的分类 2.2 氨基酸 2.3 肽 2.4 蛋白质的结构 2.5 蛋白质结构与功能的关系 2.6 蛋白质的性质与分离分析技术 定义——由许多不同的L-α-氨基酸按一定的序列通过酰胺键（肽键）缩合而成的，具有稳定的构象（空间结构）并具有特定功能的生物大分子 。 蛋白质的功能 构成生物体的重要组成成分 在生命活动中具有的特异性功能 2、分 类 分子形状：球蛋白质、纤维蛋白质、膜蛋白 化学组成 简单蛋白质：分子中只含氨基酸残基 结合蛋白质：分子中除氨基酸外还有非氨基酸物质，后者称辅基。 按功能分 活性蛋白质：如酶、激素蛋白质、运输和贮存蛋白质、运动蛋白质、受体蛋白质、膜蛋白质等 非活性蛋白质：如胶原、角蛋白等 定义：指既含有一个碱性氨基又含有一个酸性羧基的有机化合物。 是构成蛋白质的结构单位 合成蛋白质需20种氨基酸，且均属 L-氨基酸（甘氨酸除外）。 必需氨基酸：人体必不可少，而机体内又不能合成的，必须从食物中补充的氨基酸。 每一种氨基酸都具有D-型和L-型两种立体异构体 把一个氨基酸结晶加入到pH7.0的纯水中，得到了pH6.0的溶液，问此氨基酸的pI值是大于6.0？小于6.0？等于6.0？ 小于6 ①与水合茚三酮的反应 ?与甲醛的反应 ?与2,4-二硝基氟苯(DNFB)的反应 ④与异硫氰酸苯酯反应 茚三酮在弱酸性溶液中与氨基酸共热，所有具有游离氨基的氨基酸都生成蓝紫色复合物（?570）。 脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应直接生成的是黄色复合物（?440）。 ?与甲醛的反应 甲醛能与氨基酸中的氨基作用，使氨基的碱性消失。 可以用碱来滴定氨基酸的羧基，从而测定氨基酸的含量。 ?与2,4-二硝基氟苯(DNFB)的反应 鉴定多肽或蛋白质的N末端氨基酸。 2,4－二硝基氟苯缩写为DNFB或FDNB，亦称Sanger试剂 ④与异硫氰酸苯酯反应 首先被Edman用于鉴定多肽或蛋白质的N端氨基酸。 苯异硫氰酸酯缩写为PITC 2.3 肽 肽是由一个氨基酸的?－羧基与另一个氨基酸的?－氨基脱水缩合而成的化合物。 其中的氨基酸单位称氨基酸残基。 20以下 ——高聚肽 低聚肽， 20以上 ——多肽 肽类物质的特点： 具有特定排列顺序的AA的线性聚合物 有一个-N 端和一个-C端 具有一定的方向性，-N端走向-C端 肽键的特点 具有部分双键特性，不能自由旋转,呈现相对的刚性和平面化。 生物活性肽： 生物体内具有特殊生物活性的肽。 是一种游离状态，分子量较小的肽类。 谷胱甘肽 --SH 生物体内抗氧化剂 2.4 蛋白质的结构 蛋白质的分子结构包括 一级结构(primary structure) 二级结构(secondary structure) 三级结构(tertiary structure) 四级结构(quaternary structure) 1、蛋白质的一级结构（化学结构）　 指多肽链中氨基酸的组成及排列顺序（主要为肽键，包括二硫键） 指蛋白质分子中所有原子和基团在三维空间中的分布和肽链的走向。 蛋白质分子的构象可分为二、三、四级结构。 三维结构示意图　 研究蛋白质构象的方法 应用间接的X射线衍射法（技术） 研究溶液中蛋白质构象的光谱学法 ——核磁共振法、紫外差光谱、荧光等。 （1）稳定蛋白质三维结构的作用力 非共价键：氢键、疏水相互作用力、范德华力、盐键 共价键：二硫键 （2）二级结构(Secondary structure） 指多肽主链有一定周期行的，由氢键维持的局部空间结构。 维系力：氢键 类型：?-螺旋、?-折叠、?-转角、?-凸起、无规则卷曲 ? ?-螺旋 肽链主链绕假想的中心轴盘绕成螺旋状 右手?-螺旋 3.613 -螺旋 螺距 0.54nm, 影响α-螺旋形成和稳定的因素 a.R基大小的影响，甘氨酸由于侧链太小，构象不稳定；极大的侧链基团（存在空间位阻）； b. 带相同电荷的R基连续存在（同种电荷的互斥效应）； c.有Pro等亚氨基酸存在（不能形成氢键），肽链中出现脯氨酸就中断α螺旋，形成一个“结节”。 ?-角蛋白 卷发(烫发)的生物化学基础 肌球蛋白与肌动蛋白 ??-折叠 结构特点： 肽链伸展，按层排列, β-折叠有两种类型 平行：所有肽链的N端处于同一端，氢键不与肽链走向垂直。 如：β- 角蛋白。 ?-折叠和?-螺旋的转变 ?-螺旋? ?-折叠?完全抻展 ?-角蛋白 丝心蛋白：具有高的抗张强度、柔软、有一定的伸展度。 ??-转角(?- 弯曲） 多肽链中第1氨基酸残基的-C=O与第4个残基的-N-H形成氢键 回折部分通常由四个氨基酸残基构成 两种类型：肽键回折1800 。 甘氨酸和脯氨酸常出现在转角中。 ④