15版微生物检查法要点.pptVIP

15版微生物检验方法 一、环境条件 10版 15版 二、菌液制备 15版 菌种名称 制备方法 计数培养基适用性检查 计数方法适用性检查 细菌数 霉菌酵母菌总数 细菌数 霉菌酵母菌总数 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌 枯草芽孢杆菌 胰酪大豆 胨琼脂培 养基或胰 酪大豆胨 液体培养 基，培养温度30 ～ 35℃，培养时间18～ 24 小时 胰酪大豆胨 琼脂培养基 和胰酪大豆 胨液体培养 基，培养温 度30 ～ 35℃，培养 时间不超过 3 天，接种 量不大于 100cfu 胰酪大豆胨琼脂培养基/ 胰酪大豆胨液体培养 基 （ MPN 法），培养 温度30 ～ 35℃，培养时间不超过3 天，接种量不大于100cfu 10版 菌种名称 制备方法 计数培养基适用性检查 计数方法适用性检查 需氧菌数 霉菌酵母菌总数 细菌数 霉菌酵母菌总数 金黄色葡萄球菌 大肠埃希菌 枯草芽孢杆菌 接种至营养肉汤培养基中或营养琼脂培养基上，培养18-24小时。 营养琼脂培养基30-35℃培养48小时，计数，接种量50-100cfu 营养琼脂培养基30-35℃培养48小时，计数，接种量50-100cfu 15版 菌种名称 制备方法 计数培养基适用性检查 计数方法适用性检查 需氧菌数 霉菌酵母菌总数 细菌数 霉菌酵母菌总数 白色念珠菌 沙氏葡萄糖琼脂培养基或沙氏葡萄糖液体培养 基，培养温 度20 -25℃，培养时间2 ～ 3天 胰酪大豆胨 琼脂培养 基，培养温 度30 ～ 35℃，培养 时间不超过 5 天，接种 量不大于 100cfu 沙氏葡萄 糖琼脂培 养基，培养 温度 20～ 25℃，培养 时间不超 过5 天，接种量不大于100cfu 胰酪大豆胨 琼脂培养基 （ MPN 法不适用），培 养温度30～ 35℃，培养 时间不超过 5 天，接种量不大于 100cfu 沙氏葡萄 糖琼脂培 养基，培养 温度 20～ 25℃，培养 时间不超 过5 天，接 种量不大 于100cfu 菌种名称 制备方法 计数培养基适用性检查 计数方法适用性检查 霉菌酵母菌总数 霉菌酵母菌总数 白色念珠菌 改良马丁培养基或改良马丁琼脂培养基上，23-28℃培养24-48小时。 玫瑰红钠琼脂培养基23-28℃培养72小时，计数，接种量50-100cfu。 玫瑰红钠琼脂培养基23-28℃培养5天，计数，接种量50-100cfu。 酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基23-28℃培养72小时，计数，接种量50-100cfu。 含蜂蜜，王浆的液体制剂，用玫瑰红钠琼脂培养基测定霉菌数，用酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基测定酵母菌数，合并计数23-28℃培养5天，接种量50-100cfu 10版 15版 菌种名称 制备方法 计数培养基适用性检查 计数方法适用性检查 需氧菌数 霉菌酵母菌总数 细菌数 霉菌酵母菌总数 黑曲霉 沙氏葡萄 糖琼脂培 养基或马 铃薯葡萄 糖琼脂培 养基，培养 温度20～25℃，培养时间5～7天，或直到获得丰富的孢子 胰酪大豆胨 琼脂培养 基，培养温 度30 ～ 35℃，培养 时间不超过 5 天，接种 量不大于 100cfu 沙氏葡萄 糖琼脂培 养基，培养 温度 20～ 25℃，培养 时间不超 过5 天，接 种量不大 于100cfu 胰酪大豆胨 琼脂培养基 （ MPN 法不适用），培 养温度30～ 35℃，培养 时间不超过 5 天，接种量不大于 100cfu 沙氏葡萄 糖琼脂培 养基，培养 温度 20～ 25℃，培养 时间不超 过5 天，接 种量不大 于100cfu 菌种名称 制备方法 计数培养基适用性检查 计数方法适用性检查 霉菌酵母菌总数 霉菌酵母菌总数 黑曲霉 改良马丁培养基或改良马丁琼脂培养基上，23-28℃培养5-7天。 玫瑰红钠琼脂培养基23-28℃培养72小时，计数，接种量50-100cfu。 玫瑰红钠琼脂培养基23-28℃培养5天，计数，接种量50-100cfu。 10版 菌液稀释 10版 a:用0.9%无菌氯化钠溶液制成50-100cfu/ml的菌液。 b:加入3～5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9％无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后吸出孢子悬液至无菌的试管内，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9％无菌氯化钠溶液制成每1ml含孢子数50～100cfu 的孢子悬液。 15版 a:用PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌液。 b:加入3～5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9％无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后吸出孢子悬液至无菌