19全身用药的毒性研究要点.pptxVIP

第二十章全身用药的毒性研究广州中医药大学药学院药理学教研室zhangxj@gzhtcm.edu.cn张晓君毒性反应类型定性出现和消失时间可能的靶器官和死亡原因致死量定量最大给药量半数致死量第一节急性毒性试验一、概念和目的1、了解新药急性毒性的强弱LD50ED50相对毒性：治疗指数（LD50/ED50）主要目的为：1．了解新药急性毒性的强弱以半数致死量LD50为例，化合物的LD50越小毒性越强。治疗指数：是指LD50与半数有效量ED50间的比值。新药研究早期主要用治疗指数来衡量候选化合物的安全性，治疗指数至少大于10，才具有进一步作其他新药临床前研究的价值。2．为长期毒性和特殊毒性试验的剂量设置提供依据3、获取新药毒性反应信息毒性反应症状、靶器官、致死原因等一般情况毒性大小有明显种属差异特殊情况无明显种属差异对一期临床的指导意义4．新药研制过程中，工艺路线尚未定型时，对产品除了理化性质分析外，还可通过LD50值的比较，观察生物效应的显著差异，以明确试验产品的质量。此外，研究复方制剂新药时，还应判断配伍后与单药应用的毒性大小的差别。二、基本内容（一）实验动物选择和受试物受试物：制备工艺稳定、符合临床用质量标准、注明名称、来源、批号、含量、保存条件、配制方法，附自检报告辅料、溶媒：注明批号、规格、生产厂家、并符合试验要求啮齿类动物动物非啮齿类动物动物种类、性别、年龄、数量。小鼠体重18-22g，大鼠体重160-180g犬的年龄一般为4—6月龄，猴的年龄一般为2—3岁动物体重每组的差别要求不超过±10％。通常采用两种性别的动物进行试验，雌雄各半。若采用单性别动物进行试验，则应阐明其合理性。通常采用健康成年动物进行试验。如果受试物拟用于儿童或可能用于儿童，建议必要时采用幼年动物进行试验。(二)剂量与分组LD50测定方法：通过预试找出0及100％接近致死剂量正式试验，小鼠一般分4—6个剂量组，各剂量组距一般为0．65-0．85等比级数为宜，每组10只。对于非啮齿类动物给予出现明显毒性的剂量即可，给药剂量没有必要达到致死水平。给药剂量应从未见毒性剂量到出现严重毒性(危及生命的)剂量，同时设空白和(或)溶媒(辅料)对照组。(三)给药途径和给药容积两种以上给药途径，其中一种必须推荐临床用药的途径。对溶于水的药物必须测定静脉注射的LD50除非实验动物上无法进行时，则作特殊说明。可用别的给药途径。给药容积，各组动物一般用不同浓度同体积给药。常规给药体积小鼠为0.2-0.4ml／10g，大鼠1-2ml／100g，特殊情况另作说明。(四)观察纪录及结果处理给药当天，尤其是给药4小时内应认真观察，并记录，然后连续观察7-14天，详细记录动物毒性反映情况和死亡情况，中毒症状，中毒发生时间，持续时间及恢复时间，动物发生死亡过程、死亡时间和各组死亡分布情况。对中毒表现观察记录的内容包括皮肤、黏膜、毛色、眼睛、呼吸、循环、自主活动及中枢神经系统行为表现等。对所有的试验动物均应进行大体解剖，包括试验过程中因濒死而处死的动物、死亡的动物以及试验结束时仍存活的动物。任何组织器官出现体积、颜色、质地等改变时，均应记录并进行组织病理学检查。1、最大给药量测定法在受试药物合理的最大容积和最大浓度条件下，单次给予试验动物不产生死亡最大给药量试验。一般使用10~20只动物，连续观察14天。2、近似致死剂量法该方法主要用于非啮齿类的动物试验。试验方法如下：一般采用6只健康的Beagle犬或猴。犬的年龄一般为4—6月龄，猴的年龄一般为2—3岁。三、急性毒性试验常用试验方法根据小动物的毒性试验结果、受试物的化学结构和其他有关资料，估计可能引起毒性和死亡的剂量范围。按50％递增法，设计出含数个剂量的剂量序列表。根据估计，由剂量序列表中找出可能的致死剂量范围，在此范围内，每间隔一个剂量给一只动物，测出最低致死剂量和最高非致死剂量，然后用二者之间的剂量给一只动物。如果该剂量下动物未发生死亡，则该剂量与最低致死剂量之间的范围为近似致死剂量范围；如果该剂量下动物死亡，则该剂量与最高非致死剂量间的范围为近似致死剂量范围。根据小动物的毒性试验结果、受试物的化学结构和其他有关资料，估计可能引起毒性和死亡的剂量范围。按50％递增法，设计出含数个剂量的剂量序列表。根据估计，由剂量序列表中找出可能的致死剂量范围，在此范围内，每间隔一个剂量给一只动物，测出最低致死剂量和最高非致死剂量，然后用二者之间的剂量给一只动物。如果该剂量下动物未发生死亡，则该剂量与最低致死剂量之间的范围为近似致死剂量范围；如果该剂量下动物死亡，则该剂量与最高非致死剂量间的范围为近似致死剂量范围。3、固定剂量法固定剂量法：是不以死亡作为观察终点，而是以明显的毒性体征作为终点进行评价的方法。试验选择5、50、500和2000mg／kg四个