2-1微生物的实验室培养.要点.ppt

巴斯德鹅颈瓶实验 专题2 微生物的培养与应用 (一) 概念、特点： 个体难以用肉眼观察的一切微小生物之统称。微生物包括细菌、病毒、真菌、和少数藻类等。（但有些微生物是肉眼可以看见的，像属于真菌的蘑菇、灵芝等。） 结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用. 细菌 细菌：单细胞不分枝的原核微生物。 细菌细胞微小而透明，通常用适当染料染色后显微镜观察 细菌 细菌 *细胞壁 结构特点：坚韧且有弹性 细胞壁有哪些功能？ ①固定细胞外形； 菌 落 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 有鞭毛细菌常形成边缘不规则的菌落；具有荚膜的菌落表面较透明，边缘光滑整齐；有芽孢 的菌落表面干燥皱褶；有些能产生色素的细菌菌落还显出鲜艳的颜色 。 细菌的营养类型 根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。 自养菌（autotroph） 异养菌（heterotroph） 腐生菌 寄生菌 大部分病原菌 朊病毒（蛋白质病毒） 1.培养基内所含的基本物质 (1)水 (2)碳源 (3)氮源 (4)无机盐 2.培养基内所需的其他条件 (1)特殊营养物质---- ? 如：培养乳酸杆菌需要在培养基中添加维生素 (2)pH值 如:培养霉菌需酸性、培养细菌需中性或微碱性 (3)氧气的含量 如:培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件 练习1（多项选择） 1、下列细菌中，能利用含碳无机物作碳源的是 A 光合细菌 B 根瘤菌 C 硝化细菌 D 乳酸菌 2、培养大肠杆菌的培养基中，必需含有的碳源和氮源是 A 糖、有机酸等 B 二氧化碳、碳酸盐 C 蛋白质 D 无机氮化物 3、下列叙述不正确的是 A 培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 B 液体培养基和固体培养基所含的最基本物质不相同 C 微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌 (1)按物理状态分 液体培养基 固体培养基 连线下列选择培养基 分离酵母菌、霉菌等真菌： 分离金黄色葡萄球菌： 分离固氮菌： 分离自养型微生物： 伊红-美蓝培养基 金属光泽深紫色菌落 （三）无菌技术 1、获得纯净培养物的关键: 2、无菌技术包括的四大方面(参看教材15页) 3、消毒与灭菌 (1)消毒： 概念：使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。包括芽孢和孢子吗？ 方法: 煮沸消毒法 巴氏消毒法:如牛奶的消毒 化学药剂消毒:酒精、氯气、石碳酸、煤酚皂溶液等 紫外线消毒 （2）灭菌 概念：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 方法：a 灼烧灭菌 b 干热灭菌 c 高压蒸汽灭菌 二、实验操作 （一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 计算－称量－溶化－灭菌－倒平板 （二）纯化大肠杆菌 接种方法有： 平板划线法和稀释涂布平板法 （三）将接种后的培养基和一个未接种的培养基放入37℃恒温箱中培养12h和24h后，观察并记录 三、课题延伸：菌种的保藏 1、斜面保藏 （临时保存） 2、甘油保藏 （长期保存） 第四课时 2.稀释涂布平板法: (1)系列稀释操作: 涂布平板操作 讨论:涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ (2)碳源 可作为碳源的物质有: 含碳无机物: 、 、 、 含碳有机物： (3)氮源 可作为氮源的物质有: 含氮无机物： 、 、 、 含氮有机物： 思考: 1)无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 2)消毒和灭菌有何不同？ 3)为什么消毒牛奶要用巴氏消毒法? 4)请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 ①培养细菌用的培养基与培养皿 ②玻棒、试管、烧瓶和吸管 ③实验操作者的双手 思考1 溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一起加热? 答: ②加琼脂的目的是什么? 答: