TM-112薄层色谱法.docVIP

薄层色谱法 起草人 审核人 审核人 批准人 部门 QC QA QC 质量管理部 姓名 饶涛 黄祥彪 汪大才 邓志军 签名 日期 分发部门： 质量管理部QC 目的 制订薄层色谱法的标准操作规程，使薄层色谱操作规范化。 范围 需进行薄层色谱检查的物料和制剂。 职责 QC 操作内容 4.1 仪器与材料 4.1.1 除另有规定外，常用5cm×20cm，10cm×20cm或20cm×20cm的规格，要求光滑、平整，洗净后不附水珠，晾干。 4.1.2 固定相 最常用的有硅胶G 、硅胶GF254、硅胶HF254，其次有硅藻土、硅藻土G、氧化铝、氧化铝G 、微晶纤维素、微晶纤维素F254等。其颗粒大小，一般要求直径为5～40μm。薄层涂布，一般可分无黏合剂和含黏合剂两种；前者系将固定相直接涂布于玻板上，后者系在固定相中加入一定量的黏合剂，一般常用10%～15%煅石膏（CaSO4·2H2O在140℃加热4小时），混合后加水适量使用，或用羧甲基纤维素钠水溶液（0.2%～0.5%）适量调成糊状，均匀涂布于玻板上。 4.1.3 涂布器 应能使固定相在玻板上涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。 4.1.4 点样器 常用的微量注射器或定量毛细管，应能使点样位置正确、集中。 4.1.5 展开室 应使用适合薄层板大小的玻璃制薄层色谱展开缸，并有严密的盖子，除另有规定外，底部应平整光滑，应便于观察。 4.1.6 显色剂 按各品种项下规定,可采用喷雾显色,浸渍显色或置碘蒸汽中显色,用以检出斑点。 4.1.7 显色装置 显色可用设备,喷雾瓶或使用喷雾器,要求用压缩气体使显色剂呈均匀细雾状喷出;浸渍显色可用专用的玻璃器皿或适宜的玻璃缸代替,碘汽熏碘显色可用双槽玻璃缸或适宜大小的干燥器代替。 4.1.8 检视装置,为装有可见光254nm及365nm紫外光光源及相应滤片的暗箱。 4.2 操作方法 4.2.1 薄层板制备 除另有规定外，将1份固定相和3份水在研钵中向一方向研磨混合，去除表面的气泡后，倒入涂布器中，在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度0.2~0.3mm），取下涂好薄层的玻板，置水平台上于室温下晾干后，在110℃活化30分钟，立即置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度（可通过透射光和反射光检视）。表面应均匀、平整、光滑、无麻点、无气泡、无破损 及污染。 4.2.2 点样 除另有规定外，用点样器点样于薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边2.0cm，样点直径为2～4mm，点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜，点间距离约为为1.0~2.0cm。点样时必须注意勿损伤薄层板表面。 4.2.3 展开 4.2.3.1 展开缸如需预先用展开剂饱和，可在缸中加入足够量的展开剂，并在壁上贴二条与缸一样高、宽的滤纸条，一端浸入展开剂中，密封缸顶的盖，使系统平衡或按各品种规定操作。 4.2.3.2 将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，浸入展开剂的深度为距薄层板底边0.5～1.0cm（切勿将样点浸入展开剂中），密封缸盖，待展开至规定距离（一般为10～15cm），取出薄层板，晾干，按各品种项下的规定检测。 4.2.3.3 显示与检视 荧光薄层板一般可用荧光猝灭法，普通薄层板，有色物质可直接检视，无色物质可用物理和化学方法检视。物理方法是检出斑点的荧光颜色和强度：化学方法一般用化学试剂显色后立即覆盖同样大小的玻板，检视。 5. 附件 无 6. 参考文件 中国药典2010版二部附录V B 7.文件修订历史 版本号 生效日期 修订原因和内容 01 按新版GMP认证修订，替换00版本文件。 检验方法 文件编号: 版本号: 0页码: 3 生效日期: