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(5)改变激发光的波长以避开荧光干扰 在测量拉曼光谱时,对于不同的激发光拉曼谱带的相对位移是不变的,荧光则不然,对于不同的激发光,荧光的相对位移是不同的。 所以选择适当的激发光,可避开荧光的干扰。 在实际工作中常用这一方法识别荧光峰。 (6)其他方法 非线性技术: coherent anti-Stokes Raman spectroscopy (CARS ) For low-wavenumber modes look at anti-Stokes side since fluorescence starts in most cases only in the Stokes region Fluorescence quenching by means of surface enhanced Raman scattering (SERS ) ? 左 健 中国科学技术大学 理化科学实验中心 显微共焦拉曼光谱及应用 特别是显微拉曼光谱可进行空间分辨、原位无损的光谱分析。 拉曼光谱是以光子为探针,它对样品的结构和成分极为敏感并有很强的特征性,就像人的指纹一样。 435.8 nm (Hg-line) Spectrum taken by Raman in 1929; Resolution ca. 10 cm-1 Sample Volume: ca. 1 liter Exposure time: ca. 40 hours Spectrum taken with a modern Raman set-up; Resolution ca. 0.5 cm-1 Sample Volume: ca. 1 ml Accumulation time: ca. 1 s Raman Spectrum of CCl4 Stokes anti-Stokes Isotopic (35,37Cl) splitting of n1-vibration 461.5-CCl435 455.1-CCl335Cl37 453.4-CCl235Cl237 从拉曼光谱获取的信息 characteristic Raman peak Composition and structure of material changes in frequency of Raman peak stress/strain state Crystal size polarization of Raman peak crystal (molecule) symmetry and orientation width of Raman peak quality of crystal(crystal size) 不同的物质,其拉曼谱是不同的,就象人的指纹一样,因此拉曼光谱可用于物相的分析与表征。 水拉曼特征峰随NaCl 浓度变化趋势图,曲线A, B,C,D , E,F的盐度分别为:0.05 ,0.20 ,0.50 ,1.00 ,2.00 ,5.00mol/ L W/Si多层膜 年代估计 Bertoluzza等对28个年代在1750~1940年之间的工艺玻璃杯 进行了拉曼光谱分析,仅从拉曼峰的位置和强度并不能反映出与样品的年代有什么关系,但发现1080cm-1的拉曼峰的强度与位于高波数的荧光峰强度的比值与年代有关。 给出一个经验公式: y=a+bx y=log(I1080/I荧光) x= 年代 a=-25.384 b=0.013 Raman spectroscopy: high characteristic good spatial resolution (micro Raman) minimal sample preparation all solvents can be used but: biological samples often show high fluorescence biological molecules appear often at low concentration level Why SERS spectroscopy? SERS quenches fluorescence essential oil 10 mm Raman silver colloids M. x piperita 514.5 nm 2000 1500 1000 500 Wavenumber / cm-1 Raman Intensity SERS improves the detection li
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