免疫组化幻灯教学版要点.pptVIP

掌握免疫组化技术的概念、原理、优点、ABC染色的基本操作，了解免疫组化染色技术的其他几种方法及临床应用。 学习重点 主要讲述的内容 概述 免疫组化的概念和优点。 免疫组化染色前的准备。 抗体的标记 如何降低非特异性染色。 免疫组织化学方法 免疫组化结果的判定以及染好切片的关键 免疫组织化学的应用。 免疫酶组织化学染色图片举例。 抗原修复 常规石蜡切片的标本一般均采用甲醛固定，甲醛固定的部分组织细胞免疫组化的敏感性明显降低，主要原因为甲醛固定过程中形成的醛键以及甲醛固定导致的蛋白与蛋白之间的交联，均会封闭部分抗原决定簇，同时甲醛的这种交联作用会影响细胞膜的通透性，使抗体分子难于渗入细胞内，从而影响染色效果。 ?化学方法(酶消化方法) 胰蛋白酶(trypsin)消化方法 酶浓度一般为0.05%~0.1%, 胃蛋白酶(pepsin〉消化方法 0.4%胃蛋白酶 链霉蛋白酶(poruse)消化方法 浓度为0.1%。  ?物理方法 单纯加热方法; 高压加热方法; 微波方法 微波方法 将切片常规脱腊后水洗，放入盛有枸橼酸缓冲液的容器中，置微波炉加热沸腾，时间为5min×2次。 加热完毕，将切片缸在室温下放置，使缸内温度自然下降至40℃左右，蒸馏水洗，进入免疫组化染色。 抗体的标记 为了使抗原