基因扩增技术教案-杨江勇.docVIP

教 案 专业：11级医学检验专业（专科） 课程：生物化学检验 教案编号： 课 题 基因扩增技术 课时 2节 任课教师 授课日期 2013年3月7日1.2节 授课方式 多媒体教学 教学方法 探究法、演示法、归纳法等 重点 PCR原理、操作及临床应用 难点 对PCR原理的理解 教学目标： 掌握PCR的原理与操作；熟悉PCR的临床应用；了解PCR的发展史 教学内容提要 1.复习《生物化学》关于DNA复制的内容； 2.讲述PCR的发展史； 3.讲述PCR的原理； 4.演示PCR的操作过程； 5.举例说明PCR的临床应用； 6.归纳总结本节内容并布置练习题。 教学设计：（包括教学环境教具教学参考资料《生物化学检验》第三版，段满乐主编，人民卫生出版社，2011.8 《生物化学》第六版，周爱儒主编，人民卫生出版社，2004.7 《生理学》第五版 姚泰主编，人民卫生出版社，2002.11 《临床生物化学与检验》第四版，周新 府伟灵主编，人民卫生出版社，2007.7半保留复制半不连续复制 底物：dATP、dGTP、dCTP、dTTP；聚合酶：依赖DNA的DNA聚合酶，简称为DNA-pol； 模板：解开成单链的DNA母链；引物：一小段RNA；其它酶和蛋白质因子。 2.PCR发展史及原理 （25分钟） PCR的发现与提出：Mullis发现PCR技术的过程 PCR原理：由一对引物介导,通过温度的调节，使双链DNA变性为单链DNA、单链DNA与引物复性（退火）成为引物-DNA单链复合物、以及在dNTPs存在下DNA聚合酶使引物延伸而成为双链DNA（引物的延伸）；这种热变性-复性-延伸的过程，就是一个PCR循环；一般通过20～30个循环之后，就可获得大量（106倍）的要扩增的DNA片段。 3.PCR的操作过程 （25分钟） 对目的基因的选取，引物的设计与合成，PCR实验体系的建立；PCR结果的检测 4.PCR的临床应用 （20分钟） 介绍临床常用PCR检测项目，并设置职业情景进行分组讨论，并写出书面报告 5.小结与练习 （15分钟） 五、实践能力培养方法 主要采用图片与视频教学相结合的方法，在演示图片与视频的同时，分步骤进行原理的解析，使PCR过程形象化，直观化。 六、板书设计 第五节 基因扩增技术 一 PCR发展史 二 PCR的原理（重点与难点） 1.普通PCR原理 2.定量PCR原理 三 PCR操作过程（重点） 1.PCR操作流程 2.PCR操作注意事项 四 PCR的临床应用 1.PCR临床常规检测项目 2.PCR的应用前景 教学小结： 普通PCR原理：DNA的半保留复制与不连续复制； 定量PCR原理：DNA的半保留复制与不连续复制；荧光染料或探针即时检测DNA的拷贝量； PCR操作流程：选定靶基因；设计上下游引物；提取DAN或RNA；建立PCR扩增体系；进行靶基因扩增； 操作注意事项：上下游引物设计的特异性；DNA或RNA提取的纯度；建立合适的扩增体系与条件；对扩增基因的检测。 课后检测： 通过提问与做练习题方式进行知识的巩固与检测。 课后思考题： 1.试述PCR实验过程并说明影响PCR实验结果的因素。 2.以扩增小鼠平滑肌收缩蛋白（SM22α）基因为例进行分组讨论，并在课后写出书面报告。 教学后记： 本节内容抽象，复杂，临床实用性强，讲授时要注意结合多种教学方法与手段，特别是在讲授PCR的操作时要结合视频教学进行分步讲解，便于学生掌握，多与学生互动并设置教学情景与职业情景充分激发学生的兴趣与主观能动性，使学生能够掌握理论知识，并能把理论应用于实践，起到良好的教学效果。