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* 免 疫 学 实 验 任课教师: 杨晓燕 Tel:O) E mail: immuneyxy@163.com 免疫学试验注意事项 1、必须穿白大衣进实验室; 2、实验中注意实验室秩序,禁止喧哗打闹; 3、爱惜实验器材,如发生损坏应及时报告; 4、节约实验药品; 5、实验结束后,要回收的玻璃器材如载玻片等,放于指定容器内;废品弃于垃圾袋内,严禁丢弃在水槽中。 6、实验完毕,清理桌面,班长安排清洁,老师检查后,做清洁同学方可离开。 试验报告书写格式 1、试验主要步聚; 2、试验结果; 3、结论; 4、讨论。 试 验 题 目 血清学反应: 即体外进行的Ag-Ab反应,由于抗体主要存在于血清中,故又称血清学反应。 特点: (1)高度特异性; (2)分子表面的可逆性结合; (3)Ag、Ab比例合适才会出现肉眼可见的反应。 肉眼可见的凝集物。 影响条件 1、电解质:0.85% NaCl等; 2、酸碱度:pH6~9; 3、温度:370C。 Ag-Ab反应种类: 1、凝集反应; 2、沉淀反应; 3、补体结合反应; 4、中和反应; 5、免疫标记技术。 实验一 凝集实验 一、实验内容 1、直接凝集实验(玻片法)——血型鉴定 每人做 2、间接凝集实验——类风湿因子检测 小组做 二、目的要求 1、掌握血清学反应概念、特点、影响条件 及类型; 2、了解凝集反应的原理、类型及其用途; 3、熟悉常用凝集反应的实验方法及结果判定。 凝集反应: 颗粒性抗原(细菌、细胞等)与相应抗体在适当的条件下发生特异性结合反应,出现肉眼可见的凝集物,称为凝集反应。 颗粒性Ag——凝集原; 相应Ab——凝集素。 颗粒性抗原: 光镜下可见,肉眼观呈混浊悬液,如细菌、RBC等。 可溶性抗原: 光镜下不可见,肉眼观呈澄清透明,如蛋白质、多糖抗原等。 凝集反应 沉淀反应 凝集反应类型: 直接凝集反应 间接凝集反应 1、直接凝集反应 (1)玻片法: (2)试管法: 已知Ab,测Ag,为定性实验; 已知Ag,测Ab,为定量实验; 用途:鉴定菌种、菌种分型、血型检查。 用途:诊断肠热症(Widal reaction) 诊断布氏菌病(Wright reaction) 2、间接凝集反应 (1)间接凝集试验 已知可溶性Ag包被载体,检测未知Ab。 例如:间接乳胶凝集试验检测类风湿因子等。 (2)反向间接凝集试验 已知Ab包被载体,检测未知可溶性Ag 例如:某些传染病和原发性肝癌的早期诊断验 (3)间接凝集抑制试验 例如:妊娠试验 *
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