细胞生物学09真核细胞内膜系统、蛋白质分选与膜泡运输提高要点.pptVIP

在非细胞系统中蛋白质的翻译过程与SRP、DP和微粒体的关系 1、SNAREs SNAREs的作用是保证识别的特异性和介导运输小泡与目标膜的融合。动物细胞中已发现20多种SNAREs，分别分布于特定的膜上，位于运输小泡上的叫作v-SNAREs，位于靶膜上的叫作t-SNAREs。v-SNAREs和 t-SNAREs都具有一个螺旋结构域，能相互缠绕形成跨SNAREs复合体（trans-SNAREs complexes），并通过这个结构将运输小泡的膜与靶膜拉在一起，实现运输小泡特异性停泊和融合。 在SNAREs接到新一轮的运输小泡停泊之前，SNAREs必须以分离的状态存在，NSF（N-ethylmaleimide-sensitive fusion protein, NSF）催化 SNAREs的分离，它是一种类似分子伴娘的ATP酶，能够利用ATP作为能量通过插入几个适配蛋白（adaptor protein）将SNAREs复合体的螺旋缠绕分开 T 和 V SNAR SNAR复合体 SNAR复合体的解离 在神经细胞中SNAREs负责突触小泡的停泊和融合，破伤风毒素和肉毒素等细菌分泌的神经性毒素实际上是一类特殊的蛋白酶，能够选择性地降解SNAREs，从而阻断神经传导 精卵的融合、成肌细胞的融合均涉及SNAREs，另外病毒融合蛋白的工作原理与SNAREs相似，介导病毒与宿主质膜的融合。 * * 第三节 细胞内蛋白质的分选与膜泡运输 一、信号假说与蛋白质分选信号 ⒈信号假说：分泌性蛋白N端序列作为信号肽，指导分泌性蛋白到内质网膜上合成，然后在信号肽引导下蛋白质边合成边通过易位子蛋白复合体进入内质网腔，在蛋白质合成结束前信号肽被切除。 信号肽位于蛋白质的N端，一般有16-26个氨基酸裂基，其中包括疏水核心区、信号肽的C端和N端3部分。 信号识别颗粒（SRP）、信号识别颗粒的受体（停泊蛋白，DP）。 信号肽的一级序列 信号肽一级序列由疏水核心（h）、C端（c）和N端（n） 三个区域构成。以血清白蛋白和HIV-1型病毒的糖蛋白 gp160信号肽为例，显示出两者的n区长度明显不同 ⒉蛋白质分选信号 细胞内合成的蛋白质、脂类等物质之所以能够定向的转运到特定的细胞器取决于两个方面：其一是蛋白质中包含特殊的信号序列，其二是细胞器上具特定的信号识别装置。 信号肽→信号识别颗粒→信号识别颗粒受体 实验 组别 含有编码信号 SRP DP 微粒体序列的mRNA 结 果 ? 1 + - - - 产生含信号肽的完整多肽 2 + + - - 合成70～100氨基酸残基后， 肽链停止延伸 3 + + + - 产生含信号肽的完整多肽 4 + + + + 信号肽切除，多肽链进入 微粒体中 * “+”和“-”分别代表反应混合物中存在（+）或不存在（-）该物质。 细胞类至少存在两类蛋白质分选的信号： ①信号序列：存在于蛋白质一级结上的线性序列，通常15-60个氨基酸残基，有些信号序列在完成蛋白质的定向转移后被信号肽酶切除。 ②信号斑：存在于完成折叠的蛋白质中，构成信号斑的信号序列之间可以不相邻，折叠在一起构成蛋白质分选的信号。 ③每一种信号序列决定特殊的蛋白质转运方向，如输入内质网的蛋白质通常N端具有一段信号序列，含有6-15个带正电荷的非极性氨基酸。目前对于信号斑了解较少，主要是因为它存在于复杂的三维结构中，很难将其分离出来研究。 分泌性蛋白在内质网上的合成过程 基质中核糖体 半合成－粗面内质网－高尔基体－溶酶体或质膜或胞外 全合成－转运至细胞器 二、蛋白质分选的基本途径和类型 翻译后转运途径 共翻译转运途径 蛋白质合成和分选的分泌途径 分泌蛋白的成熟过程 蛋白质的分选运输途径主要有四类： ⒈门控运输（gated transport）：如核孔可以选择性的主动运输大分子物质和RNP复合体，并且允许小分子物质自由进出细胞核。 ⒉跨膜运输（transmembrane transport）：蛋白质通过跨膜通道进入目的地。如细胞质基质中合成的蛋白质在信号序列的引导下，通过线粒体上的转位因子，以解折叠的线性分子进入线粒体。 ⒊膜泡运输（vesicular transport）：蛋白质被选择性地包装