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二、胚胎发育的过程 体外受精、 胚胎体外培养 胚胎移植、 胚胎分割、 胚胎干细胞 早先时候的成功例子: 1、1890年,世界首例胚胎移植例子,安哥拉兔的胚胎移植。 2、1982年世界第一胎试管牛犊问世。 试管动物技术——体外受精 卵子 精子 体外 受精卵 早期胚胎 再经移植 产生后代 一、体外受精 1、概念: 采用雌性动物的卵细胞和雄性动物的精子,使其在试管中受精。 2、过程: (1)精子的收集和获能; (2)卵母细胞的收集和培养; (3)获能精子和卵细胞的受精; 精子获能是指精子获得穿透卵子透明带能力的生理过程,是精子在受精前必须经历的一个重要阶段。其实,精子在附睾内已经获得了受精能力,但由附睾分泌的一种物质附于精子表面,抑制了他的受精能力,这种物质被称为去能因子。精子进入女性生殖道以后,去能因子的作用被解除,精子才具有真正的受精能力,这就是精子获能。能够解除去能因子的物质称为获能因子。 卵母细胞的收集和培养 获能精子和卵细胞的受精 二、胚胎体外培养 概念:将受精卵在人工环境下培养成早期胚胎。 三、胚胎移植 1.概念:也称“借腹怀胎” 将经济价值较高、遗传性状优秀的母畜,经过激素处理,使其超数排卵后受精,然后将发育的早期胚胎分别移植到同期发情的代孕母的子宫内,通过代孕母妊娠产仔的技术。 供体: 提供胚胎的个体。 受体: 接受胚胎的个体。 为什么胚胎移植能成功? 移动到任何一头动物子宫内都能发育吗? 同种动物发情排卵后,在一段时间内供体\受体具有相同的生理环境。 为什么能收集到胚胎? 早期胚胎一定时间内处于游离状态。 供体和受体会不会发生排斥? 同种动物之间基本上不排斥。 移植的胚胎能否保留供体双亲的特性,是否具有受体的性状? 胚胎虽然与受体有生理和组织上的联系,但其遗传特性不受受体的影响。 3.胚胎移植成功与否要有两个关键条件 (1)胚胎移植一般应在同种的雌性供体和受体之间进行。 (2)进行胚胎移植的供体和受体的生理状态要相同。 胚胎移植的优 势: 充分发挥雌性个体的繁殖潜力 缩短供体本身的繁殖周期 保持供体优良特性 大规模繁殖 节约成本\费用 可用于保护珍稀动物 …… 三、胚胎分割 1.概念: 3、胚胎分割的基本过程 胚胎移入培养液; 分割胚胎(机械法、酶处理); 移植胚胎给受体; 着床产仔。 五、胚胎干细胞 1.概念:(ES细胞),是由早期胚胎(囊胚)的内细胞团分离出来的一类细胞。 2.特点: 1)形态:体积小、细胞核大、核仁明显. 2)功能:具有发育的全能性,可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。 3)体外培养ES细胞可以增殖而不分化。对它可以进行冷冻保存,也可以进行遗传改造。 胚胎干细胞的培养 培养关键: 需要一种能促进胚胎干细胞的生长,但抑制其分化的一种培养体系。 (胚胎成纤维细胞) 培养过程: 1、 制备饲养层(胚胎成纤维细胞); 2、培养液中培养胚胎到内细胞团突出饲养层; 3、酶消化或机械剥离内细胞团; 4、分为单个细胞。 5、加饲养层培养。 六、胚胎干细胞核移植 概念: 将胚胎干细胞核移植到去核的卵细胞中,经过胚激活、胚胎培养、胚胎移植后直接由受体完成克隆动物的技术。 过程: 细胞核移植;胚胎培养;胚胎移植。 胚胎干细胞的主要用途: (1)基因敲除,获得移植器官 (2)培育出人造组织器官,用于器官移植 (3)改良创造动物新品种。 胚胎干细胞的应用前景 干细胞的分类: 按分化潜能分: (1)全能干细胞:具有形成完整个体的分化潜能。如胚胎干细胞。 (2)多能干细胞:具有分化出多种细胞组织的潜能,失去发育成完整个体的能力。 (3)专能干细胞:只能向一种类型或密切相关的两种类型分化的细胞。如骨髓干细胞、皮肤生发层细胞等。 按来源分: (1)胚胎干细胞:当受精卵分裂发育成囊胚时,内层细胞团的细胞即为胚胎干细胞。 (2)成体干细胞:指已分化特定组织中的未分化细胞,可来源于胚胎、胎儿和成人的组织中,如造血干细胞、神经干细胞、成肌细胞等。 胚胎工程:通常指各种胚胎操作技术。如对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术,研究的重点有体外受精、胚胎体外培养、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞等。 体外获能方法:培养法、化学诱导法 对不同动物,采取卵母细胞的方法不同 常用方法:用促性腺激素处理超数排卵,用穿刺针吸取 在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。 胚胎体外培养的培养液有什么要求? 移植的时期: 发育到8细胞以上的胚胎,如早期囊胚 良种雌性动物。 一般品种的雌性动物。 选择
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