03基因与基因工程程序.ppt

4、后基因组计划 基因克隆计划:克隆和鉴定人的3-5万个基因 基因组多样性计划: 代表基因组到个体基因组的研究 cDNA计划:目标是建立不同组织、不同基因在不同时期的表达“目录”，即个体基因表达的时空图 蛋白组计划:HGP的基因序列可以马上转化为信息的和物质的蛋白质一级结构。仿照HGP从单一的蛋白质转向大规模的种类、结构和功能的研究 细胞计划:从分子水平到细胞水平的研究 中国的HGP指导思想：参与、分享，重点是利用我们的资源，依靠我们自己的力量，为我们的子孙克隆我们自己的基因 基因工程 理论上的三大发现 DNA为遗传物质：Avery的肺炎双球菌转化实验 DNA双螺旋结构的发现和DNA半保留复制机制 遗传密码与中心法则 一、基因工程的诞生 基因工程 技术上的三大发明 限制性内切酶和连接酶： 　　DNA的“手术刀”与“缝纫机” 载体： 　　运送遗传物质的工具，如质粒、病毒等 逆转录酶： 　　从mRNA到 DNA，使真核基因制备成为可能 二、基因工程的基本内容 目的基因的获得 目的基因与载体的连接成重组DNA分子 重组DNA分子导入受体细胞 筛选重组克隆 基因表达与产物分离 基因工程 基因工程 1、目的基因的获得 1) 从基因所在的生物体直接取得 限制性内切酶 2) 人工合成DNA片段（DNA合成仪） 3) PCR反应合成DNA 4) mRNA反转录成cDNA 5) 机械切割的方法: 超声波、高速喷射 基因工程 ４、筛选重组克隆 ５、基因表达与产物分离 4.基因工程的意义 医学：抗病毒、抗癌因子、新型抗生素、疫苗、 抗衰老保健品、心脏血管药物、生长因子诊断剂 2. 轻工食品：氨基酸、助鲜剂、甜味剂、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶蛋白酶、生物拆分混旋体 3. 能源：石油二次开采、纤维素分解、太阳能转换 4. 环保：微生物生态种群 5. 信息：蛋白芯片、基因芯片 第四次工业大革命 基因工程的意义 蛋白类杀虫剂（生物农药）、抗广谱虫害植物； 农作物品种改良；高营养、长保存、抗环境压力、花卉颜色与型状； 畜牧业：高蛋白乳汁、鱼生长激素、饲料利用 固氮 第二次农业大革命 （麻醉外科术是第一次医学大革命） 分子病：（文明病富贵病）基因治疗，遗传病、心脑血管病、糖尿病、癌症过度肥胖综合症、老年痴呆症、骨质疏松症 . 抗衰老：端粒酶编码基因基因疗法补充突变基因原始产物更换突变基因 第二次医学大革命 基因工程的意义 1.转移载体 常用病毒作为基因转移的载体。 基因转移的方法主要有： 重组反转录病毒（RNA病毒） 介导的基因转移 重组DNA病毒介导的基因转移 遗传病的治疗 遗传与优生 2.化学疗法与物理疗法 化学方法 用磷酸钙微量沉淀外源DNA，然后与靶细胞混合；靶细胞摄入沉淀物，外源基因进入核内，与染色体发生整合 物理方法 主要有显微注射法和电穿透法。电穿透法是借助电流使DNA直接穿过细胞膜，从而转入细胞中 遗传病的治疗 遗传与优生 遗传病的治疗 3.基因治疗的方式 体外原位治疗： 从患者体内取出带有基因缺陷的细胞 通过基因转移进行遗传修正 将经过遗传修正后的细胞进行选择和培养 将修正后的细胞通过融合或移植的方法转入患者 遗传与优生 遗传与优生 1.取骨髓 2.分离干细胞并培养 3.用含有治疗基因的病毒处理干细胞 干细胞和基因治疗 遗传与优生 4. 病毒进入单个细胞,治疗 基因进入细胞核 5.处理后“改正”的细胞注射入血管 6.处理细胞对退化(病)肌肉或其 他组织的受损害信号应答并进入 7. 处理细胞修补损坏组织并产 生健康组织 遗传病的治疗 3.基因治疗的方式 体内基因治疗： 通过转移载体将具有治疗功能的基因直接转入病人的某一特定组织中 遗传与优生 遗传病的治疗 4.反义疗法 通过阻遏或降低目的基因的表达 达到治疗的目的。反义疗法通过引入目 的基因的mRNA的反义序列与mRNA相 配对后，用于翻译的mRNA的量就大大 减少，因而合成的蛋白质的量也相应大 大减少 遗传与优生 遗传病的治疗 5.核酶的基因治疗 核酶（ribozyme）是指具有催化裂解活性 的RNA分子。通过载体将核酶转入细胞， 特异性地切割有害基因 遗传与优生 优生学 预防性优生学（负优生学）： 研究降低产生不利表现型的不利基因的途径。A、开展婚前检查B、禁止近亲结婚C、提倡适龄生育：20岁以下年轻母亲所生子女中，先天畸形发生率比25～34岁者要高50%，40岁以上母亲所生子女中，先天愚型的发病率要比25～34岁者高10倍。D、开展遗传咨询 遗传与优生 优生学 E、开展产前诊断 F、妊娠早期避免接触致畸剂：如链