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ADVIA 2120 分析原理 基本原理 1 ． Flowcytometry 流式细胞学原理 待检样本在反应池中与试剂进行前处理，再经由仪器液路控制进入Flowcell(流动比色池)进行测定。 Flowcell测定的原理主要是应用特定的光源打在血球上产生散射，并利用设置在不同角度的信号探测器，探测光线散射和吸收的情况，经过信号分析运算就可以得到相关的血球特性资讯（如：体积，内容物浓度，密度），配合多个不同的Flowcytometry装置所收集足够的血球信息，就能够得到完整的血球计数以及分类的结果。 2.MIE光散射理论 MIE光散射理论：光线照射在颗粒上所造成之光散射强度测定公式如下 S = F（(，(，(，(，(） S 散射光强度 (使用波长 ( 折射率 ( 容积 ( 测量角度 ( 形状因子 应用以上公式，固定其中几个因子，就可以测定出血球或者特定颗粒的折射率与体积 若将血球球形化，应用固定波长的光源，设置两个固定角度的光线探测器（高角度H，低角度L），带入这个公式： SL = F1（(，(，(，(L，(） SH = F2（(，(，(，(H，(） 分解这个方程式可以得到容积与折射率的计算方式： 容积( = f1（(，SL，SH ，(L，(H，(） 折射率( = f2（(，SL，SH ，(L，(H，(） 应用MIE光散射理论，将可测定出血球的体积（容积）与血球的内容物浓度（折射率）。 3.Cluster Analysis群组分析 当血球细胞经过Flowcell测定后，可得到血球细胞分布图（如下），如何通过统计学与电脑运算方式来界定各种类细胞，是血球分析仪是否准确的重要因素，其中：Cluster Analysis（群组分析）普遍应用在血球分析，此技术能精确的计算出如下数个群组的分界，不但定义出正常的细胞族群，对于异常细胞的出现也能提供敏感的讯息。 4.UFC(Uni-Fluidics Circuit) 集成流路系统 集成流路系统就是将传统血球记数仪中所应用的管路，反应池，控制阀，试剂运送，管路清洗等功能加以整合，利用UFC特殊材质的去极性及无变形的特性，增加仪器的稳定度与降低定期保养工作频率。 5．光源 应用最新科技的二极管激光发生器，具有光源稳定，体积小，寿命长的特性。 LASER SCATTER 激光散射测定 测定项目：RBC/PLT，BASO，RETIC DARK FIELD OPTIC 卤素灯测定 测定项目：白血球分类 6．Flowcell 结构 1．Flowcell 2.shuttle Nipple 3.Sample Nipple 4.Sheath Nipple 5.Optics Lens 6.Mirror 7.Low angle detector 8.Hi angle detector 9.light source Flowcell运作原理： 鞘液经由Sheath Nipple进入Flowcell形成一稳定介质，再将处理过的细胞（稀释，染色或球形化）经由Sample Nipple以稳定的流速注入Flowcell，当细胞通过光源时会因不同的细胞特征（体积，染色程度，血红素浓度或核密度）产生不同程度的散射，再由Flowcell后方两个探测器（高角/低角）测定光线变化，两个探测器所收集到的信号加以分析计算，就可以得到所需要的细胞特征。 7.RBC/PLT反应测定原理 测定项目：红细胞计数与形态分析 反应：稀释，球形化，固定 全血样本2ul与RBC/PLT稀释液1250ul混合，形成625倍稀释，此步反应主要是将红细胞形态改变，由原来的“双凹圆盘型”改变为‘球形’即球形化，试剂中含有固定剂可以使改变形态的红细胞保持稳定，以利于光学法测定细胞体积与血红素浓度。 MIE光散射理论的应用 血液经前处理后，样本中所含的红细胞，血小板等均呈圆球状，经由流体力学的控制，血球可以依序进入Flowcell，并通过激光照射后出现不同的光散射，利用高/低角度探测器分别测量在此两角度的吸光度变化，就可以测定出细胞的物理特性：如细胞体积，内容物浓度，血红素浓度等参数。 MIE MAP MAP直交展开 红细胞分布图（九分图） 1. 60fl 2. 120fl 3. 28g/dl 4. 41g/dl 红细胞分布图相对位置 红细胞碎片 2.高色素红细胞3.红细胞4.血小板 1.小红血球阈值 2.大红血球阈值 3.低血色素阈值 4．高血色素阈值 血小板分布图相对位置 1.血小板 2.大血小板 3.红细胞 4.红细胞碎片 5.噪音 6.红细胞阴影 8．BASO通道测量原理 主要反应：破