鸡马立克氏病流行与防控试题.ppt

REV在MDV基因组中的插入验证 Hot-Spot PCR（REV和MDV上下游交叉引物检测，病毒重组的验证） MDV pBAC-C全基因组序列 C? 全长 TRL UL IRL IRS US TRS REV LTR 大小(bp) 177811 12913 113542 12913 12941 10350 12346 533（2） 位置 1-177811? 964- 13876 13877- 127418 127419- 140331 141210- 154150 154151- 164500 164501- 176846 153096-152564 165795-165263 IRs区插入的相对位置（MDV Md5） LTR MDV086 （细胞质蛋白） MDV085 （预测蛋白） MDV083 （反义RNA蛋白） MDV084 （ICP4） MDV087 （MDV1 S2 ） MDV088 （ICP22） MDV089 （Us10 ） IRs区 TRs区插入的相对位置（MDV Md5） LTR MDV097 （MDV1 S2 ） MDV096 （gE ） MDV095 （gI ） MDV098 （细胞质蛋白） MDV099 （预测蛋白 ） MDV101 （反义RNA蛋白） MDV100 （ICP4 ） TRs区 插入重组的意义： 反转录病毒是混乱宿主和疱疹病毒遗传物质的元件之一。 这种重组可能改变MDV的组织趋向性、传播方式、致病性、疫苗保护性---MDV的进化？ MDV meq序列-88株， 测定序列-63株（2006-2013） 参考序列-25株 （中国分离毒株-11株，国外毒株-14株） 我们测的63株中除了3株位于弱毒分支外，其他的60株位于一个独立进化分支（不同于国外的毒株）。 MDV meq 我国MDV流行毒株处于一个独立的进化分支 A： MDV毒株的长重复区遗传进化树 B：MDV毒株的短重复区遗传进化树 15株MDV（全基因组）分子进化 MD的防控 防止雏鸡MDV野毒早期感染 控制混感---重组、加重MD？ 免疫特点---非清除性抗肿瘤免疫、占位干扰作用---超感染和超感染抑制？---控制传播 疫苗---毒株？---感染程度？ 免疫剂量 二次免疫  控制污染源 - 抗病力 - 免疫 MD疫苗株的应用 Four generations of MD Vaccines: 致弱的血清1型毒株(1970) HVT (1970s) 双价苗HVT+ SB1 (1983) CVI988 (Rispens株) (1990s)，“814”株 我国MD疫苗使用情况 曾经使用的疫苗： HVT、CVI988、“814”、HVT+SB1、HVT+Z4、HVT+SB1+“814”、 CVI988+ HVT 当前主要使用的疫苗： 种鸡、蛋鸡-CVI988、“814”、HVT、CVI988+ HVT 肉鸡-主要为HVT HVT-IBDV-VP2---“立克法”“威力克” 814弱毒疫苗种毒株的建立 策略：自然弱毒中筛选、建立---弱毒疫苗种毒株 优点---安全性好、稳定性好和免疫效力好。 黑龙江省牡丹江（白洛克和来航）---多年没有发生MD --毒株培育：K株---DEF、CES；---“814” S株---DEF、QEF --毒株血清型和致病性：血清1型，自然弱毒株 安全性：（1）接种鸡12个月-（2）回归易感鸡10代 免疫原性：实验室免疫攻毒（J-1株） K株的KC25和45代（稳定性）--PI：88.9 传代特点: 1.KC50-非融合细胞---50-120代也很少见 2.病毒粒子的数量较多-几乎每个细胞都有病毒粒子 3.容易见到---有囊膜的完全病毒粒子 母源抗体干扰---HVT、“814”免疫鸡群 MD疫苗“814”株---净化 净化必要性---强细胞嗜性---禽源RNA病毒、支原体污染---免疫失败的主要原因之一 ---MDV 814病毒DNA拯救 疫苗 强毒株 保护指数（PI） “814”克隆株 J-1（国内vMDV） 82-93 GA （vMDV） Md5（ vvMDV） ZY（分离毒株） SY（分离毒株） “814”克隆株的免疫