检验医学专业实验I 重点整理(输血学+血液基础检验).doc.doc

主页君的话：从这学期（大三上）开始，检验医学专业实验的笔试就比较类似于正常考试了，题型有名解、填空、问答和论述，但一般无选择。 对于临床检验基础部分，实验考和理论考的区别并不大，凡是做过的实验，其原理、注意事项和思考题仍要求掌握，除此之外还需要知道其参考值和临床意义，（举个例子，实验“白细胞分类计数”，你需要知道其原理、注意事项和思考题，还需要知道其正常参考范围和临床意义，如中性粒细胞一般占50~70%、其比例增高最常见于细菌感染；还要知道什么是中性粒细胞核左移/核右移） 对于临床输血检验部分，其实验较少，仍然是掌握实验的原理、注意事项和思考题，最后一次实验是去血站参观，可能会根据参观的情况出一道相关的论述题（去年这道论述题高达15分），所以参观的时候稍微用点心吧。 临床输血检验部分 血型鉴定 【定义与原理】 ①正向定型（direct/forward typing）：用已知的特异性抗体（标准血清）检查红细胞的未知的抗原。 用已知IgM类特异性血型抗体与被检测红细胞在盐水介质中反应，若出现凝集现象，表明被检测红细胞膜上有相应抗原，从而判断血型。 ②反向定型（indirect/reverse typing）：用已知血型的标准红细胞检查血清中的未知抗体。 用已知的标准A、B、O型红细胞与被检测血清反应，若被检测血清与已知型别的标准红细胞出现凝集，则证明被测定红血清中存在与该红细胞抗原相对应的抗体，反之则没有。 【注意事项】 严格标记，防止混淆。 观察时，应该先肉眼观察，不确定则用显微镜低倍镜观察有无凝集。防止出现冷凝集或者某些疾病干扰引起的假凝集。 Rh血型 【抗原种类】：到目前为止已发现40多种Rh抗原，但与临床关系最为密切的只有5种，按其抗原性强弱依次为D、E、C、c、e，5种抗原中D的抗原性最强对临床更为重要。临床上习惯将含D抗原的红细胞称Rh阳性；不含D抗原的红细胞称Rh阴性。 在临床输血中，一般只做D抗原鉴定，凡被检红细胞和抗D血清凝集者为Rh阳性，不凝集为Rh阴性。目前已研制出单克隆抗D，可用于Rh血型鉴定。 交叉配血试验（cross matching test）：将献血者的红细胞、血清（浆）分别与受血者的血清（浆）、红细胞混合，观察有无凝集反应，称为~。 这是输血前必须做的红细胞系统的配合性试验，以确定受者或供者血液没有可测的不相配合的抗原和抗体成分。 试验包括主侧和次侧配血：1、主侧是受血者血清与供血者红细胞的反应；2、次侧是受血者红细胞和供血者血清的反应，只有两侧均不凝集或溶血才能输血。 【结果观察】 先观察上层有无溶血，再倾斜试管轻轻摇动，观察底层有无凝集，必须用显微镜观察，两管既没有凝集也没有溶血，方可输血。 【质量控制】 ①用于交叉配血的病人(受血者)血液标本应该是抽取的新鲜血，供血者的标本是刚从血袋剪下来的原已加热封闭两端小管中的血液。 ②用试管法作交叉配血试验，不能用玻片法。 ③用生理盐水洗涤红细胞去除血浆，预防纤维凝块的形成。 ④配血管中发生溶血现象，表明有抗原抗体反应同时还有补体参与，是配血不和的严重情况。 ⑤盐水配血阴性但有反复输血史或妊娠史的受血者，应加检查IgG血型抗体的交叉配血试验。 ⑥为确保输血安全，应输同型血。 【临床意义】 ①进一步验证受血者与供血者血型鉴定是否正确，发现ABO血型的不规则抗体以及ABO血型以外的配血不和，以避免血型鉴定错误而导致的输血后严重溶血反应。 ②若受血者一次输血超过1 600～2 000ml时，除了做受血者与供血者之间的交叉配血外，还应作供血者之间的交叉配血，以防止供血者相互间血型不合及不完全抗体的存在，保证输血的安全。 抗体效价测定（antibody titration）：是测定血清中抗体浓度的半定量方法。对待检血浆或血清进行连续倍比稀释，以肉眼可见凝集的最高稀释倍数的倒数来表示效价。 将被检测抗血清做倍比稀释后，加入一定量的抗原红细胞，观察凝集程度，以最大稀释倍数能与相应红细胞抗原发生凝集的试管稀释倍数之倒数定为效价。 唾液定型：ABH抗原不仅存在于红细胞膜上，还程度不同地存在于很多其他体液当中，其中以唾液含量最多，这些血型物质都是是半抗原，并且是水溶性的。凡是唾液中有血型物质的为分泌型，否则为非分泌型。 【临床意义】 ①辅助鉴定血型。 ②检查羊水，预测ABO血型。 ③中和ABO血型系统的天然抗体，有助于鉴定抗体的性质。 血清丙氨酸氨基转移酶（ALT)测定 【原理】 ALT催化ɑ-酮戊二酸与丙氨酸之间的氨基转移反应： L-丙氨酸+ ɑ-酮戊二酸 （ALT） → L-谷氨酸+丙酮酸 （可逆反应） 经一定时间反应后，加入2,4二硝基苯肼终止反应，并与溶液中的两种ɑ-酮酸生成相应的2,4二硝基苯腙，在碱性条件下呈棕红色。但两