动物细胞培养和核移植技术(上课用)111精讲.ppt

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二、动物细胞培养条件 二、动物细胞培养条件 * 动物细胞工程常用的技术手段: 动物细胞培养技术 动物细胞核移植技术 动物细胞融合技术 生产单克隆抗体技术 ----基础 一、动物细胞培养 (一)概念P44: 从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 (二)原理: 细胞增殖 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 原代培养 单个细胞 剪碎,再用胰蛋白酶/胶原蛋白酶处理 加培养液 传代培养 胰蛋白酶 (三)动物细胞培养过程: 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 1、选材: 优点:细胞分化程度低,分裂能力强, 容易培养。 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 单个细胞 胰蛋白酶/胶原蛋白酶 2、分散的单个细胞的原因: 与培养也充分接触,易摄取养分,排出代谢废物; 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 原代培养 单个细胞 胰蛋白酶 加培养液 3、动物细胞生长特点: 要求: 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 ①细胞贴壁: ②接触抑制: 传代培养 胰蛋白酶 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 原代培养 单个细胞 胰蛋白酶 加培养液 4、原代培养: 消化后的初次培养(分瓶前)或10代以前的培养。 5、传代培养: 分瓶后的培养。 传代培养 胰蛋白酶 传代培养的细胞一般传至10代就不易传下去 动

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