复制.ppt

第一节 复制的基本规律 二、双向复制 细胞的繁殖有赖于基因组复制而使子代得到完整的遗传信息。 原核生物基因组是环状DNA，只有一个复制起点（origin)。向两个方向解链，即双向复制。 真核生物每个染色体上有多个复制起始点。 复制子（replicon）：是独立复制的功能单位。 复制子的定义 DNA中发生一次复制的单位称为复制子(replicon)（一个DNA分子可能含多个复制子）。 复制子是根据它含有复制所需的控制元件来定义的，在复制的启动位点具有起始点（origin)，在复制的终止位点具有终点（terminus)。起始点仅作用于所在复制子。 注：在每个细胞周期中，每个复制子发生一次复制，且只发生一次。 质粒一般是一个自主环状的DNA基因组，构成一个独立复制子； 原核生物基因组中一般只含一个复制子，在唯一的起始点启动就会引起整个基因组复制； 真核生物基因组含多个复制子（一般40-100kb/个）。 复制眼概念 复制叉移动方向的确定 领头链(Leading strand) 随从链(Lagging strand) 冈歧片段（Okazaki fragment） 第二节 DNA复制的酶学和拓扑学变化 需要 模板 质粒：存在于细菌染色体外能自我复制的DNA，作为基因工程的常用载体 线粒体DNA（mtDNA） 容易发生突变，损伤后的修复困难，因此与衰老关系密切。 起始:形成复制叉replication fork需解决两个问题 DNA解开成单链，提供模板 合成RNA引物，提供 3? -OH末端 延长: DNA-pol Ⅲ ( DDDP-Ⅲ )的5? → 3?的聚合活性使核苷酸之间生成3?，5?磷酸二酯键 模板 以DNA单链为模板 底物 dNTP（dATP、dGTP、dCTP、dTTP） 引物 以小片段RNA为引物，在 RNA引物的 3? -OH末端上开始逐个添加dNTP 按碱基配对原则 （A = T G ≡ C） 按5? → 3? 方向 第三节DNA生物合成过程 条件： 1.底物 (dNMP)n+dNTP (dNMP)n+1+PPi 5.DNApol Ⅲ催化领头链(leading strand)和随从链(lagging strand) DNA的生成。 复制,包括引物合成,只能从5’ → 3’. 领头链(前导链):在DNA复制时,以母链为模板合成其延长方向与复制叉方向一致的,连续合成的子链,称 随从链(延缓链) :在DNA复制时,以母链为模板合成其延长方向与复制叉方向相反的,不连续合成的子链,称 冈崎片段:在DNA复制中出现DNA片段,是冈崎发现的故称为冈崎片段. 复制的终点ter(termination) 随从链合成后,去掉5’端RNA引物 DNApolⅠ催化填补空隙(5’ → 3’) DNA连接酶连接复制片段3’-OH与5’P RNA酶水解RNA ? 细胞能否分裂，决定于进入S期及M期这两个关键点。 ?多复制子 复制子(replicon)：相邻两个复制起点之间的距离。复制子是独立完成复制的功能单位。复制有时序性，即复制子以分组方式激活而不是同步起动。 参与者： DNA-pol α (引物酶活性) pol δ (聚合酶、解螺旋酶活性) 拓扑酶 复制因子 (replication factor, RF) 增殖细胞核抗原 (proliferation cell nuclear antigen, PCNA) (相当于原核生物DNA-pol Ⅲ β亚基，在复制起始和延长中起关键作用) 一、概念 逆转录指遗传信息从RNA流向DNA，是RNA指导下的DNA合成过程，即以RNA为模板，四种dNTP为原料，合成与RNA互补的DNA单链。 二、逆转录酶(reverse transcriptase) 催化逆转录过程的酶称逆转录酶，RNA 病毒中都含有此酶。 具有三种酶活性： RNA指导的DNA聚合酶 RNA酶 DNA指导的DNA聚合酶 二、滚环复制和D环复制 原核生物： θ复制 滚环复制（单链DNA病毒） 真核生物：多个复制起点 D环复制（线粒体） 四、RNA的生物合成（转录） Biosynthesis of RNA（transcription） 在RNA聚合酶的催化下，以一段DNA链为模板合成RNA，从而将DNA所携带的遗传信息传递给RNA的过程称为转录。 经转录生成的RNA有多种，主要的是rRNA