物理第三次绪论.docx

融合基因的方法来调控和荧光藻胆蛋白?作者张博士胡安，西安君武，王智斌，余晨，邢王二-生物学。，明周教授，雨果教授?博士，凯虹赵教授?博士第一次出版：2010六月25完整的出版史DOI：10.1002 / anie.201001094查看/保存引文引用：26文章刷新引用计数引用文献资金信息?名义k.h.z.承认从大众汽车基金会的资助（I／77900），该基金由德意志研究联合会（SFB 533，TPA1），和k.h.z.和m.z.资助国家自然科学基金30870519）。我们感谢J. R.?波拉协助写作，和K仓，H.?H.华，J.?P. Li，Y?F.太阳和J.?G.徐技术援助。摘要照明和颜色变化：从血红素载脂蛋白和发色团生物合成基因被结合在一个单一的融合构建，从而提供接入，在?体内，以藻胆蛋白。持续的荧光藻胆蛋白，以及红绿色的光–藻胆蛋白来自cyanobacteriochrome已分离的吸收和两态荧光极大值，产生e.?coli.提供反馈或得到帮助荧光和光开关的蛋白质在生命科学是无价的，考虑在数据存储应用。特别感兴趣的体内研究的荧光蛋白质的发色团是自动催化的氨基酸链生成；1他们中的一些人也可以两个状态之间的切换。2?，3另外，载脂蛋白可以自发将内源性生色团状视网膜。4?，5藻胆蛋白的开链四吡咯发色团的发色团是受显著的激发态控制由载脂蛋白。6–8吸收和游离胆色素类如藻蓝素荧光（PCB）是天然藻胆蛋白强烈增加：最大可转移超过100?nm和光化学反应路径是像光敏色素的光致变色biliproteins打开9和氰基（细菌）铬。7这些自然的变化，可能调节的光物理性质使藻胆蛋白，在原则上，优良的生物标志物和光子材料。应用程序是有限的，然而，因为比林发色团必须单独提供，然后共价连接蛋白。此前，对载脂蛋白基因共表达的基因的产品产生比林发色团内源性血红素然后把它脱辅基蛋白共价。10–12我们现在报告的另一种方法，产生不同的藻胆蛋白原位从一个单一的，多功能的基因和内源性血红素。这种方法是用两持续红色荧光藻胆蛋白基于藻蓝蛋白的合成和光致变色biliproteins的论证，从一个新的cyanobacteriochrome可以可逆地切换从一个国家吸收和强烈荧光的红色，一个光谱的分离，在绿色光谱区的吸收较少的荧光状态。基因slr1393的蓝藻集胞藻?藻红–绿色photoreversiblecyanobacteriochrome编码。全长蛋白含有三GAF结构域，但GaF3（AA 441–596）就能够自动催化结合PCB cysteine-528。21PCB对GA的结果在一个可逆的光致变色色素蛋白，称为RGS（红色–绿色开关蛋白）：Pr（λ马克斯=650?nm) is strongly fluorescent (ΦF=0.06); it is reversibly converted by irradiation with red light into state Pg（λ马克斯=539?nm), which has reduced and strongly blue-shifted fluorescence (Table?1figure?，1?一）。光开关可以重复多次；它是稳定在较宽的pH范围内，并保持在RGS嵌入到聚乙烯醇（PVA）薄膜（见辅助资料中的数据?S1和S2）。Figure?1.图查看器中打开下载幻灯片光致变色了6标记的RGS藻胆蛋白。一?pcb-gaf3）。在P的天然藻胆蛋白的吸收光谱r状态（15Z生色，厚实的蓝线）与500?nm的光照射后得到的，在Pg状态（15E生色，厚实的粉红色线）与650?nm的光得到的，和混合（多为15Z，薄固体蓝线）白光，和变性的Pr（虚线蓝线）和Pg形式（虚线粉红色线）。左：管插入含Pr（绿色）和Pg（粉红色）；右插：锌2在SDS诱导荧光。b）?pcb-gaf3：HO1：pcyA：吸收（蓝色实线）和荧光发射光谱（虚线蓝线）的Pr状态（15Z发色团）500?nm的光照射后得到的（荧光激发波长在620 nm，?）和Pg状态（15E发色团）650?nm的光照射后得到的（吸收（固体粉红色线），和荧光（虚线粉红色线）在550?nm激发）。插入显示管Pg（左）和Pr（右）。所有样品经Ni2亲和层析；天然藻胆蛋白谱录的磷酸钾缓冲液（20?MM7、pH?）含0.5?M氯化钠，8?藻胆蛋白的变性M尿素，ph?1.5.Table?1.?持续的荧光和红色–绿色光吸收和荧光定量数据（RGS）藻胆蛋白。[一]藻胆蛋白让吸收荧光?【镁?L?1文化]λ马克斯[处]e【M?1?cm?110 ]×?4?[ B ]λ马克斯?（nm）φF??15Z15E15Z15E15Z15E15Z15E[一]?谱录的磷酸钾缓冲液（20?MM?，pH 7