医学生物技术论文--120675273.doc

PAGE PAGE 20 贵阳医学院基础医学院 2006届基础医学（生物技术方向）专业本科学位论文 论文题目：MAF-1基因的时空差异表达研究 学 生：伍 凤 年 级：2006级 专 业：医学生物技术 指导教师：吴建伟教授 付萍讲师 实习单位：生物技术实训中心 2011年 3 月 3 日 目 录 摘 要 ……………………………………… 第3页 前 言 ……………………………………… 第4页 材料与方法 ………………………………… 第6页 结 果 ………………………………………… 第11页 讨 论 ………………………………………… 第15页 参考文献 ………………………………………… 第17页 致 谢 ……………………………………………… 第19页  MAF-1基因的时空差异表达研究 学生：伍凤 导师：付萍讲师 【摘要】 家蝇体内丰富的抗细菌肽、抗真菌肽等是其免疫防御机制中不可或缺的部分。家蝇抗真菌肽-1（Musca domestica antifungal peptide-1,MAF-1）是从家蝇幼虫血淋巴中所提取的，并采用固相萃取结合反相高效液相色谱(RP-HPLC)的方法分离到的一种新发现的抗真菌肽。为了进一步研究该基因在家蝇幼虫各个部位以及各个龄期的表达是否存在着差异，我们采用了Real Time-PCR技术研究了该基因在不同的发育时期(卵、1龄幼虫、2龄幼虫、3龄幼虫、蛹、成虫以及雌雄)和幼虫不同的部位(脂肪体、肠道、体壁、唾液腺)的表达量，结果显示MAF-1基因在所选的不同时期个部位都有所表达。其中幼虫期间的表达量比较高，而不同部位中，唾液腺、脂肪体表达量较高。而且，在整个家蝇的生长发育阶段，MAF-1基因的表达量是呈现下降趋势的。进一步肯定了抗菌肽在家蝇的免疫防御体系和生长发育期间，尤其是幼虫期间发挥着重要作用。为其下一步更深入探索其免疫机制的研究，丰富对昆虫天然免疫的认识及新一代抗真菌生物制剂的研制奠定了理论基础。 【关键词】家蝇 抗菌肽MAF-1 Real Time-PCR 时空表达 Abstract Inside the house antimycobacterial peptides, rich of antifungal peptide immune defenses such is the indispensable part. Domestica antifungal Musca domestica peptide - 1 (Musca domestica antifungal peptide-1, MAF - 1) domestica larva in from blood lymph extracting, and by solid-phase extraction combined with reversed phase high performance liquid chromatography (HPLC) method of RP - a new separation to discovery of antifungal peptides. In order to further study the gene domestica larva each place and all periods of expression whether there is any difference between, we use the Real Time-PCR technology research the genes in the different developmental stages (eggs, larvae, 2 age 1 year, 3rd instar larvae grubs and pupa, adult and male and female) and different parts (fat body, the intestinal tract, the body wall, salivary gland) expression and Results showed that in re-ligion MAF - 1 genes in different periods of a site have expressed. The expression of larvae quantity taller during, and different parts of salivar