细胞生物2013含泪吐血整理汇总.doc

单革考题： 生命化学起源与生命进化有哪些重要阶段不少于五个，按时间先后顺序）重要阶段为例，说明此阶段对地球环境及生命起源进化本身的影响（） 化学起源和生命进化重要阶段： 非生物合成小的有机分子（单体）（C+H=有机分子）。 单体聚合形成聚合物（蛋白质、核酸）。 合成能自我复制的分子（遗传性状）-----蛋白质和核酸 有机分子组装成原生生物-----非生物分子维持内部化学环境的平衡并展现某些生命特征。 2，你在研究中发现一个新的哺乳动物细胞中的，设计实验证明它是mRNA非编码如果证实其为非编码设计实验研究其功能） 1)验证是mRNA还是ncRNA：生物中的mRNA有的特征序列，即’帽（7G）’Poly（）。而mRNA的3’端有-30个腺苷酸组成的Poly（），可以作为鉴别mRNA的标志。 方法：首先合成-20的聚和聚dA——进行聚dT的单引物PCR，经过-10个循环——聚继续进行PCR经过循环——后，电泳。如果了的扩增条带，说明此核苷酸序列mRNA；反之，则非编码RNA。 (2)研究非编码RNA的功能：用于研究的模式生物为小鼠） ，得到的ncRNA的序列，利用生物信息学的方法，把它在基因组上定位——之后，的细胞进行基因敲除实验，使表达此ncRNA的失去此功能细胞培养，观察此基因的确实会对的生长怎样的影响，从而确定这一ncRNA的功能 后续研究可以在胚胎细胞中进行基因敲除，观察对过程有影响。 转录调控和染色质状态调控之间如何协调进行的，分别以转录抑制和转录激活为前提进行详细叙述（） 起始基因转录，需要染色解螺旋，即从紧密状态变为松散状态这样RNA聚 合酶才能够结合，进而起始转录过程这时染色质可以说处于活化状态。反之若 质高度螺旋，便不能进行转录过程，这时染色质处于失活状态，如巴氏小体即是处 于状态。 DNA结合与DNA结合，调控其表达。 ARE基因：色氨酸阻遏子蛋白的结合改变其构象。 在基因调控中起到重要作用。在基因和抑制中都起到重要作用。 1)转录抑制过程：抑制过程包括多个方面，抑制转录激活因子和DNA的结合、抑制RNA聚合酶活性组蛋白修饰以及染色质等等。，当染色质结构改变，即从状态转变为高度螺旋时，便不能进行mRNA的合成，转录即被抑制。染色质结构改变的因素有：组蛋白的乙酰化（后利于高螺旋状态的形成）染色体结合蛋白的作用、C中胞嘧啶的甲基化作用等。 (2)过程：激活结合到上，染色质复合体发生组蛋白修饰酶加入发生共价修饰的激活蛋白结合到基因的调控上之后mediator(介导物)、一般的转录因子以及RNA聚合酶——启动子处发生前起始复合体的聚合，之后加入其他的基因激活蛋白再之后复合体中加入蛋白转录 转录激活过程中组蛋白的变化：富含Lys组蛋白水平降低；H2A、H2B二聚体不稳定性增加；组蛋白发生；H3组蛋白巯基暴露。 从microRNA和i通路的发现中你得到哪些启（列举三点或详述一点）） ： （1）合适模式动物的选择非常重要 RNAi是在研究秀丽杆线虫（C. elegans）反义RNA（antisense RNA）的注射正义RNA（sense RNA）和反义RNA均能有效并特异性地抑制秀丽杆线虫par-1基因的表达，该结果不能使用反义RNA技术的理论做出合理解释正义RNA抑制同源基因表达的现象是由于体外转录制备的RNA中污染了微量dsRNA而引发，并将这一现象命名为RNAi一个新的发现后，其作用要经过一段较长时间很多人的研究才能逐步。说明学科的不是单个人、单个实验室的就可以完成的。 简述雌性哺乳动物体细胞X染色体随机失活的过程。（5分） X 染色体失活包括一系列相关的过程: 启动、传播和维持。X 失活于囊胚期末开始建立。 X染色体失活始于X染色体上的特异性失活位点XIC基因座的启动朝两个方向扩展。在XIC内基因XIST（X染色体失活特异转录物）当使一条X染色体失活时，有一专一表达的独特形式，而一条有活性的X染色体没被表达。XIST的表达产物是一顺式作用的核RNA，而不编码生成蛋白质。XistRNA顺式包裹表达它的染色体并引发快速基因沉默表达Xist的X染色体上的大多数基因的活性被抑制，成为失活的X染色体。Tsix的染色体保留活性过程：Xist是一条nt的长ncRNAXist ncRNA recuited complex后，通过染色体上进入位点染色上。，复合体募集一种特定的H2A1.2，使染色体保持在失活状态。，还可以募集组蛋白去酶甲基化酶的复合体。的活性由另外一个nt的长ncRNA——Tsix调控包含一个Xist的反义链，可以通过与Xist互补配对来调节其活性。 简述研究基因表达调控和表观遗传调控的数种方法（举出八种方法名称；或者写出三种方法，并对每种给出简述）。（