基因结构和表达变化与疾病的关系2010介绍.ppt

基因结构和表达变化与疾病的关系 Outline 基因突变的概念； 基因突变引起疾病的机理； 基因突变的分类； 基因突变对RNA剪接的影响； 基因突变的命名。 基因突变 基因组中核酸序列的变化称为基因突变 (mutation)。 基因突变可以是DNA序列中单个核苷酸或碱基发生改变，也可以是一段核酸序列的改变。DNA序列中涉及单个核苷酸或碱基的变化称为点突变。 通常有两种突变情况：（1）一个或多个碱基被另一种碱基所替换（即碱基替换）（2）一个或多个碱基的插入或缺失（即插入或缺失）。 基因突变可以发生在编码蛋白质的编码区(coding region)。也可以出现在非编码区，这些区域包括内含子，启动子/增强子以及转录非编码RNA的区域等。 基因突变引起疾病的机理 失去功能(loss of function)：功能降低或消失 获得功能(gain of function)：功能增强 获得新特性； 异时或异地基因表达； 显性负效应(dominant negative effect) 显性负效应 在某些情况下突变的蛋白质不仅自身不能发挥其正常的生理功能，还影响其正常蛋白质而使正常蛋白质也不能正常地发挥功能，这种蛋白质相互作用中的干扰现象称为显性负性效应。 突变的分类 碱基替换 插入 缺失 三联体重复突变 同义突变(synonymous mutation)：替换突变前后所编码的为同一氨基酸，即突变不造成基因产物的改变。 无义突变(nonsense mutation)：由于某个碱基的改变使代表某种氨基酸的密码子突变为终止密码子，从而使肽链合成提前终止。 错义突变 (missense mutation)：基因中的碱基突变导致翻译产物中相应位置形成错误的氨基酸，其结果是一个不同的氨基酸掺入到多肽链的相应位置。 替换突变产生的后果（编码区） 插入/缺失突变(insertion/deletion) 缺失(deletion)指的是DNA链上一个或一段核苷酸的消失,插入(insertion)指的是原来没有的一个碱基或一段核苷酸链插入到DNA分子中间。 插入或缺失突变产生的后果（编码区）：在为蛋白质编码的序列中如果缺失或插入核苷酸，则可能发生读框移动，使其后翻译的氨基酸序列全部混乱，这种现象称为框移突变(frame-shift mutation)。 三联体重复病(triplet repeat diseases) 目前共发现20多种神经/肌肉退行性疾病与一些相关基因内的三联体重复扩增有关，故这类疾病又称为三联体重复病。 包括Huntington’s disease (HD) 和 spinocerebellar ataxias等。在一些蛋白质编码区出现 CAG 重复序列的扩增。由于CAG编码谷氨酰胺Q，又称为多聚Q（PolyQ）疾病。 表型具有多样性，重复扩增一般较小，重复序列也具有多样性，位于基因的外显子上。 包括脆性X综合症， myotonic dystrophy, Spinocerebellar ataxias, juvenile myoclonic epilepsy, 以及 Friedreich‘s ataxia。它们往往有比较多的三联体重复扩增，并且重复序列定位于非蛋白质编码区域。 三联体重复病分类 RNA剪接（RNA splicing） 转录(transcription)产生的mRNA前体在RNA剪接体的作用下，去掉内含子部分，而将外显子部分连接起来的过程即称为RNA剪接。 RNA剪接的识别位点及分支点  内含子中的3’剪接位点，5’剪接位点以及分支点是RNA剪接所必须。 其中5’剪接位点在内含子的5’端含有一个GU序列，而 3’剪接位点是在内含子的3’端含有一个AG序列。 在位于3’剪接位点AG序列的上游（即5’端）有一段富含嘧啶(C / U)的区域。在更上游的区域 即分支点，分支点序列为YNYURAY，其中Y是嘧啶，N是任意碱基，U是尿嘧啶，R是嘌呤，A是分支点。 图示RNA剪接的识别位点以及分支点 Y嘧啶，N任意碱基，U尿嘧啶，R嘌呤 RNA剪接过程 剪接体(splicesome)是一个由5个ribonucleoproteins (snRNP)组成的RNA-蛋白质复合物。其中RNA组分与内含子相互作用，而且可能介导催化功能。经典的剪接体包括U1, U2, U4, U5和 U6 snRNPs，外加一些辅助蛋白质如U2AF和SF1，具体的剪接步骤如下： E-复合物：U1复合物和辅助因子ASF/SF2, U2AF以及SF1/BBP结合5’剪接位点， A-复合物：U2复合物结合到分支位点，分解ATP； B1-复合物：U5/U4/U6形成三元复合物，U5结合