12食品肉与肉制品蛋白质含量测定.docVIP

肉与肉制品中蛋白质含量的测定（凯氏定氮法） 一、原理 在凯氏定氮过程中，样品中的蛋白质和其他有机成分在催化剂存在下，被硫酸消化，总有机氮转化成硫酸铵，然后碱化蒸馏，中和消化液使氨游离，并使用硼酸溶液吸收，形成硼酸铵，用标准酸溶液滴定，测出样品转化后的氮含量。 由于非蛋白组分中也含有氮，所以此方法的分析结果为样品中的粗蛋白含量。 二、试剂 所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制 1．硫酸铜 2．硫酸钾 3．硫酸。 4．2%硼酸溶液。 5．混合指示剂，1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基兰乙醇溶液临用时混合。 6．0.1M盐酸标准溶液。 三、仪器 海能K9860定氮仪 凯氏定氮蒸馏装置，分析天平，凯氏烧瓶，酸式滴定管，容量瓶（100mL），量桶（100mL），20mL吸管，托盘天平，10mL吸管，三角烧瓶。 四、操作方法 1．样品处理 精密称取0.2-2.0g固体样品或2-5g半固体样品或吸取10-20mL液体样品（含氮量5～80mg），准确至0.0002g，肉及肉制品取样量为1.5克。 移入干燥的125mL定氮瓶中，加入0.2g硫酸铜，6g硫酸钾及20mL硫酸，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45℃角斜支于有小孔的石棉网上。小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力（360～410℃），并保持瓶内