生物化学技术原理及应用探索.ppt

第五节 荧光分析法 3. 荧光分析法的定性和定量 定性分析： 每种荧光物质在一定条件下都有其特定的激发光谱和荧光光谱，相比只能得到被测物质的一种特征吸收光谱，荧光分析做定性分析时有更高的可靠性。荧光定性分析就是测定样品的两种特征光谱形状和波长范围，再与标准物质进行比较，从而确定待测样品与标准物质是否为同一种物质。 定量分析： 样品溶液的浓度很低，其它条件一定时，荧光强度与样品浓度成正比例关系。 根据荧光强度与溶液浓度成正比的定量关系，在一定的浓度范围内，可采取标准曲线法、比例法、联立方程式法来进行荧光物质的定量测定，方法同分光光度法类似。 * * 南京农业大学 生命科学学院 第五节 荧光分析法 4. 荧光分析法在生物学中的应用 天然荧光物质的应用。天然荧光物质的样品，可以直接通达量测其荧光来确定其存在，分布及数量。 蛋白质的内源荧光。利用蛋白质内源荧光检测蛋白，其灵敏度高于紫外吸收法。蛋白质的荧光来自色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸。 天然色素的内源荧光分析。维生素大多含有芳香环结构，本身具有较强的天然荧光，因此可以利用内源荧光检测维生素。还可以利用荧光强度的变化估算出光合效率的高低。 外源荧光物质的应用。由于天然荧光分子种类有限，在生物学和医学的实际中，应用得更加广泛的是荧光探针，即外源荧光技术。目前，荧光探针的种类已经成千上万，人们可以根据所研究问题的不同，选择不同的荧光探针。 *