发酵工程 补充.docVIP

发酵工艺调控(注意：这不是必考题，只是我另外整理的） 题型：名词解释5·3‘、填空12·1‘、选择10·2’、判断8·1‘、简答6题共35分，综合分析1题3问共10分。 酶合成调节的方式? 答：酶合成的诱导、酶合成的阻遏（分解代谢物阻遏、终产物阻遏）。 酶活调节方式？ 答： 一定数量的酶，通过其分子构象或分子结构的改变来调节其催化反应的速率,特点是反应快速。 微生物细胞的调节机制？ 答：酶合成调节（酶量调节）、酶活调节、细胞渗透性调节。 分支代谢途径中的反馈抑制模式？ 答：（1）同功酶调节： 特点：只有当Y和Z同时过量才能完全阻止A转变为B。 顺序反馈抑制： 特点：两个末端产物(Y,Z)，不能直接反馈调节途径中的第一个酶Ea，而是分别反馈调节分支点后的Eb和Ec，造成中间产物C的积累，高浓度的C再反馈调节Ea。 协作反馈抑制： 特点：在分支代谢途径中，任何一个终产物都不能单独抑制该途径的第一个酶，但当几个末端产物同时过量时，它们可以协同抑制第一个酶反应。 合作反馈抑制： 积累反馈抑制： 假反馈抑制（结构类似物反馈抑制）：吡哆醇的结构类似物：异烟肼；Val的结构类似物：-氨基丁酸。 代谢控制育种的措施？ 答：①应用营养缺陷型（渗漏缺陷型）菌株。 ②选育抗反馈调节的突变株。 ③选育细胞膜通透性突变株。 ④利用营养缺陷型回复突变株或条件突变株的方法，解除终产物对关键酶的调节。 ⑤应用遗传工程技术，创造理想的超微生物。 ⑥使用发酵环境。 渗漏缺陷型突变是使它的某一种酶的活性下降而不是完全丧失，因此，渗漏缺陷型能够少量地合成某一种代谢最终产物，能在基本培养基上进行少量的生长。 如果调节酶的基因发生突变而失活，则有两种可能性？ 答：（1）催化亚基和调节亚基的基因均发生突变； 一种可能仅仅是催化亚基发生突变。 催化亚基和调节亚基的基因均回复突变，则有两种可能性？ 答：（1）催化亚基和调节亚基恢复到第一次突变前的活性水平（对目标产物，无现实意义） 催化亚基得以恢复，而调节亚基丧失了调节的功能。 诱变剂一般可以分为物理诱变剂和化学诱变剂。 亚硝基胍（NTG）诱变：磷酸缓冲液中（中性）：NTG对DNA起作用。 何为表型延迟？ 答：表型的改变落后于基因型改变的现象（可分为分离性延迟和生理性延迟。） 何为分离性延迟、生理性延迟？ 答：分离性延迟：突变的基因经DNA复制和细胞分裂后变成纯状态，表型才能表现出来。 生理性延迟： 由杂合状态变为纯合状态，突变表型仍不能表现出来。 细菌常常通过前培养达到对数生长期。孢子在诱变前经过几小时的培养，诱使其达到孢子萌发前期。 菌悬液的制备？ 答：通常采用生理盐水。如果用化学诱变剂处理时，应采用相应的缓冲液配制，以防处理过程中pH变化而影响诱变 效果。 诱变剂的复合处理常表现为协同效应。 营养缺陷型菌株筛选方法？ 答：抗生素法、菌丝过滤法。 产量性状突变株的筛选？ 答：第一轮：（1）初筛：初筛以量为主；（2）复筛：以质为主；……第二轮开始。 糖酵解调节机制为能荷调节，何为能荷？ 答：能荷是细胞中高能磷酸状态一种数量上的衡量，它的大小可用下式表示： 能荷=[(ATP)+1/2(ADP)]/[(ATP)+(ADP)+(AMP)] 何为巴斯德效应？ 答：在缺氧的同时，葡萄糖消耗减少，乳酸堆积终止的现象。（原因：在氧存在的情况下，氧化磷酸化使NADH的H+不再转给丙酮酸生成乳酸而是转给氧，并产生大量ATP。丙酮酸进入TCA循环使柠檬酸浓度增加，由于高含量的ATP和柠檬酸变构抑制磷酸果糖激酶的活性，从而减缓了糖酵解速度和TCA循环的速度。） 工业生产几乎都是用黑曲 霉作为生产菌，黑曲霉产酸量高，转化率也高。且能利用多种碳源，因而是柠檬酸生产的最好菌种。 D-核糖发酵的代谢育种技术？ 答：（1）出发菌株选择；（2）转酮酶缺陷突变株的分离（选育）；（3）其它标记； 利用基因工程技术构建D-核糖工程菌株；（5）发酵控制。 TCA循环的调控？ 答：①ATP、ADP的影响；② 产物堆积引起抑制；③循环中后续反应中间产物变构反馈抑制前面反应中的酶； ④ 其他，如Ca2+可激活许多酶。 D-核糖的生物合成路径和育种思路？ 答： 25.柠檬酸发酵中：发酵控制：温度35－37℃；严格控制培养基中的Mn2+、Zn 2+、Fe2+ 26.脂酰CoA进入线粒体？ 答： 脂代谢的调节与糖代谢的相互关系？ 答：（1）乙酰辅酶A转运：改变线粒体膜的通透性，使乙酰辅酶A易于透过或者强化柠檬酸合成，增加柠檬酸含量，有利于脂肪酸的合成。 （2）限速反应： （3）能荷调节： 28.谷氨酸高产菌的两个特征？ 答：（1）α-酮戊二酸继续向下氧化能力下降和乙醛酸循环弱，使能能量代谢受阻。 TCA循环前一阶段的代谢减慢。 强化能