壳聚糖对bt蛋白质发酵液的絮凝研究.docVIP

壳聚糖对生物农药Bt发酵液絮凝作用的研究 张明政1,2 , 刘波1*(，林乃铨2，阮传清1, 蓝江林1 （1福建省农业科学院农业生物资源研究所,福州 350003；2福建农林大学植物保护学院，福州 350002） 摘要 为获得Bt蛋白质杀虫制剂的高效浓缩，本文采用壳聚糖对Bt-9480蛋白质发酵液进行絮凝，优化了该系统的pH值、温度、壳聚糖浓度、磁力搅拌的速度和时间对壳聚糖在Bt蛋白质发酵液絮凝效果的影响。结果显示：当pH值为5.0-6.0，温度30-35℃，壳聚糖浓度为0.5g/L，磁力搅拌器中速搅拌5 min后，壳聚糖作为Bt-9480蛋白质发酵液的絮凝剂，可除去发酵液中的大部分水及有色杂质，使发酵液中的Bt蛋白质得到了很好的浓缩。 关键词：壳聚糖；Bt-9408发酵液；絮凝；浓缩 Study on effect of chitosan to protein flocculation fermentation liquid of Bt biocide ZHANG MingZheng1,2, LIU Bo2*, LIN Naiquan2, RUAN ChuanQing1, LAN JiangLin1, 1 Institute of Agro-Biological Resources, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Fuzhou 350003, China ；2College of Plant Protection, Fujian Agriculture and Forestry University. Fuzhou 350002 China Abstract: In order to attain a efficient concentration of Bt insecticidal protein, the chitosan was used as the flocculant for protein flocculation of Bt fermentation liquid. The conditions of pH, temperature, concentration of chitosan, magnetic stirring speed and time of the flocculant liquid for the protein flocculation were optimized in the research. The results showed that when pH was at 5.0-6.0, temperature in 30-35℃, 0.45g/L of chitosan, the high flocculation efficiency could be got under 5 min of middle stirring speed. Under the optimal conditions, the most of water and colorful impurities were eliminated so that the Bt insecticidal protein was effectively concentrated. Keywords: Chitosan; Fermentation Broth of the Bt-9408; Flocculation; Condensation 苏云金芽孢杆菌（B. thuringiensis）是重要的生物农药。1957年苏云金杆菌制剂首次上市销售,目前商品制剂已达100多种，是世界上产量最大，应用最广的微生物杀虫剂[1]。Bt发酵液后处理的核心问题就是将伴孢晶体等杀虫成分及其增效因子与发酵液分离，去除占质量90%以上的水分，得到干燥的工业原粉[]。因此，工业化后加工技术是影响成本的重要因素，常用发酵液的浓缩方法主要有离心法、絮凝沉降法、减压浓缩法、膜超滤法以及板框压滤法等，絮凝沉降法操作简便、处理量大、不需要昂贵的设备和特殊的试剂常用的絮凝剂中，无机的阳离子絮凝剂多为聚合铁盐或者铝盐，人工合成的阳离子絮凝剂应用最多的是聚丙烯酰胺（PAM）[，它们相比天然的有机絮凝剂最大的缺点是污染蛋白质与无机或有机合成高分子絮凝剂相比，微生物絮凝剂具有许多特点，如高效、无毒、可消除二次污染、絮凝广泛、脱色效果独特等[]，但是因为其自身代谢需要及产物，不适合絮凝发酵液 壳聚糖作为一天然的阳离子吸附剂，Bt浓缩制剂的工业化生产提供新的浓缩方法和参考,同时也为其他蛋白质下游工业技术中的浓缩步骤提供新的思路。 1.1 材料和仪器 试剂和材料： Bt-9