第八章 原生质体培养和体细胞杂交 一、原生质体研究概况 (一)、原生质体的基本概念 原生质体(protoplast):指除去细胞壁的细胞或是说一个被质膜所包围的裸露细胞,即,植物细胞或细菌细胞去除细胞壁后剩余的部分。 (二)、原生质体研究进展 1880年,Hanstein首次起用原生质体(protoplast) 1960年,Cocking首次应用酶法制备番茄根原生质体获得成功。 1971年,Takebe et al.首次得到烟草叶肉原生质体培养的再生植株。 1985年,Fujimura et al.第一例禾谷类作物-水稻原生质体培养再生植株。 1986年,Spangenberg et al.单个原生质体培养再生植株在甘蓝型油菜上获得成功。 目前已有320多种以上植物的原生质体培养成功 (三)、原生质体研究的意义 1、再生植株 2、用于远缘体细胞融合,进行体细胞杂交获得杂种植株(创造细胞质杂种)。 3、遗传转化的良好受体 4、基础理论研究的实验材料 (一)、植物材料 要获得高质量的原生质体。必须选用生长旺盛、生命力强、幼嫩部分作为材料。 1、愈伤组织及细胞悬浮培养物 外植体 诱导出愈伤组织 筛选 悬浮培养 培养至3~4个月后,悬浮培养物大小一致,较浓时作为分离原生质体的材料 2.叶肉细胞 叶肉细胞是分离原生质体的最好的细
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