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专题1 基因工程
第1课时 DNA重组技术的基本工具
目标导航 1.简述DNA重组技术所需三种基本工具的作用。2.认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。
一、基因工程的概念
基因工程又叫做____________技术或________技术,是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外__________和________等技术,赋予生物以新的____________,从而创造出更符合人们需要的新的____________和____________。
二、基因工程中的工具
1.限制性核酸内切酶
(1)简称:________。
(2)来源:主要是从____________中分离纯化而来的一类酶。
(3)种类:约4000种。
(4)功能:识别双链DNA分子某种________________;使每一条链中____________________的____________断开。
(5)功能特点:识别序列和酶切位点的________。
(6)酶切结果
①黏性末端:当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧切开时(错切),产生的是黏性末端。黏性末端是指双链DNA被限制酶切开后,切口处的两个末端伸出的由若干核苷酸组成的单链。
②平末端:当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时(平切)产生的则是平末端。
2.DNA连接酶
(1)作用:将两个DNA分子片段“__________”起来,恢复被________切开了的两个核苷酸之间的____________。
(2)种类:____________和____________。
3.进入受体细胞的载体
(1)必备条件:①在宿主细胞中能__________下来并能大量________;②多个________________,供外源DNA片段插入;③有一定的____________,便于筛选。
(2)常用载体——质粒
质粒是一种________的、结构________、独立于细菌________之外,并具有____________能力的____________分子。
(3)最常用的质粒是____________的质粒,其中含有________________。
知识点一 正确理解基因工程的概念
1.下列关于基因工程的叙述,不正确的是 ( )
A.基因工程的原理是基因重组
B.运用基因工程技术,可使生物发生定向变异
C.一种生物的基因转接到另一种生物的DNA分子上,属于基因工程的内容
D.是非同源染色体上非等位基因的自由组合
2.以下有关基因工程的叙述,正确的是 ( )
A.基因工程是细胞水平上的生物工程
B.基因工程的目的是获得目的基因表达的蛋白质产物
C.基因工程产生的变异属于人工诱变
D.基因工程育种的优点之一是可以定向地使生物产生可遗传的变异
知识点二 限制性核酸内切酶和DNA连接酶
3.限制性核酸内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制性核酸内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
(1)请画出质粒被限制性核酸内切酶Ⅰ切割形成黏性末端的过程。
(2)请画出目的基因两侧被限制性核酸内切酶Ⅱ切割形成黏性末端的过程。
(3)在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来?为什么?
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
知识点三 “分子运输车”——载体
4.质粒之所以能做基因工程的载体,是由于它 ( )
A.含蛋白质,从而能完成生命活动
B.能够自我复制,从而保持连续性
C.是RNA,能够指导蛋白质的合成
D.具有环状结构,能够携带目的基因
5.如图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图,据图回答下列问题:
(1)a代表的物质和质粒的化学本质相同,都是________,二者还具有其他共同点,如:①________________,②____________________(写出两条即可)。
(2)若质粒DNA分子的切割末端为—A —TGCGC,则与之连接的目的基因切割末端应为______________;可使用________把质粒和目的基因连接在一起。
(3)氨苄青霉素抗性基因在质粒DNA上称为_________________,其作用是________________________________________________________________________。
(4)下列常在基因工
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