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高中组
11年级
集体项目(2人)
探究叶绿素对肿瘤细胞的抑制作用
组别:高中组
学科:生物化学
探究叶绿素对肿瘤细胞的抑制作用
摘要:
绿色蔬菜是人类的主要食物,在日常膳食中可通过绿叶蔬菜的摄入,可以达到维持机体代谢、增强体质, 甚至防病抗癌的作用。绿色植物的显著特点在于绿色,其绿色的产生源于细胞内的叶绿素。早期叶绿素有造血、解毒、抗病等多种用途。叶绿素是否具有抑制癌症的作用,尤其是对于消化道肿瘤的抑制作用,尚未有详尽的报道。。类胡萝卜素的含量均类胡萝卜素大部分高等植物和藻类微生物的叶绿体是植物光合作用的场所。主要含有叶绿素(叶绿素a和叶绿素b)、类胡萝卜素(胡萝卜素和叶黄素),叶绿素a和叶绿素b主要吸收蓝紫光和红光,胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光。这些色素吸收的光都可用于光合作用。叶绿素的含量最多,遮蔽了其他颜色,而且,叶绿素吸收绿光最少,绿光被反射,所以呈现绿色。主要功能是进行光合作用。早期叶绿素有造血、解毒、抗病等多种用途。叶绿素是否具有抑制癌症的作用,尤其是对于消化道肿瘤的抑制作用,尚未有详尽的报道。MTT实验)
取对数生长期的细胞,取96孔板,每孔加入细胞悬液100μl (μl,对照组加100μlPBS,培养2小时后,小心吸取上面的培养液,加MTT(终浓度(1mg/ml),37%培养箱中培养4小时,弃上清液,每孔加入二甲亚砜(DMSO)100ml,震荡摇匀,在酶标仪上以波长540nm测定各孔的吸光度值,按公式计算细胞生长抑制率。
细胞抑制率计算公式
抑制率(%)=1- 实验组OD值 (100%
对照组OD值
3.4实验流程图:
叶绿素提取测定
(
原料 称量取样
(
在乙醇溶液中剪碎研磨 过滤
(
722分光光度计测定叶绿素浓度
2. 细胞毒性检测(MTT实验)
(
细胞培养箱图 胃癌细胞在培养瓶中生长图
(
胃癌细胞((200)图 96孔板MTT实验结果图
(
酶标仪测定吸光度值图
四、 结论与分析
4.1 菠菜和黄瓜叶绿素含量
表1 菠菜和黄瓜提取液A665 A649 A470 菠菜 0.686 0.269 0.687 黄瓜 0.212 0.088 0.219
表1显示菠菜和黄瓜提取物经722分光光度计分别在波长A665, A649, A470测定的吸光值,按前述公式分别计算菠菜和黄瓜提取物中叶绿素浓度(见表2)以及菠菜和黄瓜中叶绿素的含量(见表3)。
表2 菠菜和黄瓜提取物中叶绿素浓度(mg/L)
叶绿素a(Ca) 叶绿素b( Cb) 类胡萝卜素(CX.C) 菠菜 6.345 2.425 1.595 黄瓜 2.359 0.644 0.565
由表2可见:本次测定中菠菜提取物中叶绿素a浓度为6.345(mg/L),叶绿素b浓度2.425(mg/L),类胡萝卜素浓度为1.595(mg/L)。黄瓜中叶绿素浓度为2.359(mg/L),叶绿素b浓度为0.644(mg/L),类胡萝卜素的浓度为0.565(mg/L)。
表3 菠菜和黄瓜叶绿素含量(mg/g)
叶绿素a(Ca) 叶绿素b( Cb) 类胡萝卜素(CX.C) 菠菜 1.190 0.455 0.299 黄瓜 0.442 0.121 0.106
从表3可见:菠菜的叶绿素总含量为1.645mg/g,类胡萝卜素0.299 mg/g,均高于黄瓜中的叶绿素总含量(0.563mg/g)和类胡萝卜素含量 (0.106 mg/g)
4.2叶绿素对人胃癌细胞的存活率的影响
表4 不同稀释浓度的黄瓜和菠菜提取液酶标仪测定吸光度值
菠菜
黄瓜
1: 1
0.047
0.079
1:2
0.050
0.089
1:4
0.052
0.104
1:8
0.057
0.133
1:16
0.164
0.183
对照组
0.248
0.24
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